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主题：【求助】过硅胶柱收集到的所有馏分中没有检测到目标物，求助原因。

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jefful
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发表于：2011/02/21 22:16:53 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
过硅胶柱层析收集了96个馏分，结果没有一个馏分检测到所需的效果的！想到以下原因：
1、上柱前的样品是冷冻干燥后的粉末，可能这些物质在冷冻过程中丧失了活性；
2、收集的馏分过分稀释了目标物质；
3、在检测馏分的活性前，需要将馏分中的洗脱剂（氯仿和甲醇）旋转蒸发除去，然后用去离子水洗净蒸馏瓶的内壁，可能在此过程中损失较大；
4、最坏的可能，目标物根本没洗下来。
1和2两个原因已经排除，求助各位高手，要避免3这个可能，可以怎样改进除去洗脱剂的方法，保证物质不会损失？至于第4个原因，我上传几张洗脱前后的硅胶柱照片，各位高手帮忙判断下其中的物质是否洗下来了？




是否还有其它原因？急望高手指导。
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2011/2/22 11:02:18 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你把硅胶层抠出来用溶剂一下看看就能排除4
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阿三
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2011/2/23 19:31:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主讲到要用去离子水洗蒸馏瓶内壁，是你的样品易溶于水吧，按经验是没洗下来，样品极性太大了，而且做分离纯化的第三种假设太牵强了，
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2011/2/24 10:04:19 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
依你的分析，第三一般不可能
加大洗脱剂的极性吧，再洗洗看看怎么样
一般是没洗下来，呵呵
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2011/2/28 22:17:03 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:
你把硅胶层抠出来用溶剂一下看看就能排除4
直接用甲醇冲下来就可以了
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