主题:【求助】梯度洗脱,不上样都为什么都会出这么多的峰?

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daidaihui9
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楼主问题解决了吗?我们也遇到过同样的问题,空针走与你类似的梯度,出现很多峰,也换了所有试剂,又还了柱子,也换了仪器,都有同样的峰,很诡异,后请教相关老师,说跟柱子本身吸附能力和试剂有关,乙腈或者三氟乙酸中的成份在柱子中有强吸附,当随着乙腈浓度加大时会被洗脱下来,而等度洗脱则不会出现。
daidaihui9
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希望能共同探讨一下,我的qq是402532787,方便可以加我啊
light2357302
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在215nm波长下,流动相中的某些小杂质均有吸收,其他条件不变,改在254nm下试试
houjjun
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nzclz
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这个很明显是柱子不干净,问题不大,把柱子洗干净就好了
suiniubei
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  有几种可能:

  一是柱子污染了。要用纯乙腈多冲一段时间。可能你平时没洗好柱子,有残留。
  二是定量环污染。我不知道你的是自动还是手动进样。总之进样器污染也是有 很大可能性的。我多洗。
  这些峰都很高。残留的东西不少。而且紫外吸收强。
m3247927
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原文由daidaihui9(daidaihui9)发表:楼主问题解决了吗?我们也遇到过同样的问题,空针走与你类似的梯度,出现很多峰,也换了所有试剂,又还了柱子,也换了仪器,都有同样的峰,很诡异,后请教相关老师,说跟柱子本身吸附能力和试剂有关,乙腈或者三氟乙酸中的成份在柱子中有强吸附,当随着乙腈浓度加大时会被洗脱下来,而等度洗脱则不会出现。
进空针走梯度,会出现14min左右的峰,用的是乙腈和水(加TFA)为流动相,这个是梯度峰吗,
夏天的雪
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原文由 m3247927(m3247927) 发表:
进空针走梯度,会出现14min左右的峰,用的是乙腈和水(加TFA)为流动相,这个是梯度峰吗,
走空白出峰很可能是梯度峰,但是流动相纯度不够有杂质也可能会出峰
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