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液相色谱（LC）
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主题：【求助】换溶剂后峰的改变

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noahark
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发表于：2011/04/11 08:31:02 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
菜鸟求助，接触液相的时间还不到一个月，请懂的老师指点一下！谢谢！

苯酚类化合物（pKa=8.16-8.34，文献值），色谱条件：20mM乙酸铵：甲醇=4:6等度16min，检测波长254nm，进样量20μL
问题：我以水配制的0.1mM标准溶液在13.7min出峰，峰形很好，峰面积为1745左右。之后我换成乙腈配制相同浓度的溶液，出现两个问题，第一是峰形改变了，在13.7min左右出现不是一个漂亮的单尖峰，而是有两个肩峰的很宽的一个峰，面积也发生变化，为1435左右。

请教各位大侠这是怎么回事？
再次感谢！
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2011/4/11 8:44:30 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这都是很正常的事情，溶剂改变峰形改变，如果是条件摸索的话可是尝试多换换，DAD检测器，看水溶解的样品的出来的图谱的峰是否真的就是一个，这里需要考虑的有很多
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zhaohua8011
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2011/4/12 10:22:34 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很正常的，物质在不同的流动体系下相应不同而已！！！
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noahark
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2011/4/16 18:14:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那是不是说最终物质的含量是以这三个峰的面积总和来计算呢？继续关注中，谢谢！
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kreanu
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2011/4/17 12:37:01 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
据说溶解样品的溶液的强度不能大于流动相的强度。。。
如果你用的是反相色谱，
乙腈的强大显然是大于甲醇的，更加大于60%的甲醇，而水的强度小于60%的甲醇
你用50%以下的甲醇来溶解你的样品，看峰形会不会好一些

如果你用的是正相色谱，请自动忽略上面的话。。。
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lanpishu23
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2011/4/17 17:38:48 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是不是乙腈溶解度不好啊，溶解度不好有可能会出现这种双峰的情况
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