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主题：【讨论】关于液相梯度洗脱的问题

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发表于：2011/11/02 09:30:30 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位老师，以下的方法是我公司生产的一个品种的检测方法：
梯度洗脱　流动相A 　精密称取磷酸氢二钾0.87g，磷酸二氢钾0.41g，用水溶解后加乙腈125ml，用水稀释至1000ml，pH值为7.5。
流动相B　水－乙腈－磷酸(499:499:2)。
时间(min)　 流动相A(％)　　流动相B(％)　　流速(ml/min)
0～13　　          100　　            　0　            　　1.2
13～28　　          0　                    100　　          　1.5
28～38　　        100　　            　0　            　　1.2

像这种情况13分钟后是不是直接转去流动相B不需要过渡，而28分钟也是直接转去流动相A，但这种直接转换的方法不会对柱子产生影响吗，因为流动相A中含有盐，而流动相B中含有乙腈量比较多，就这样直接转换过去在柱子内应该会有盐析出吧。请各位老师指教一下。
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2011/11/2 9:32:17 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最好先慢慢降低比例，以免有盐析出。。。。。
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liufeilzu
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2011/11/2 12:14:08 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
药典的方法吧。一般药典梯度都这风格，流动相复杂，梯度很悬。可以更改试试
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huxiaokang
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2011/11/2 13:03:45 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
梯度转换可以稍微过度一下，比如用2min，这样系统稳定性也会好点。尤其是15cm的色谱柱，甚至更长的。
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tangtang
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2011/11/3 20:21:39 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个梯度流速也程序变化吗？
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2011/11/3 21:46:30 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我就是怕有盐析出,现在也是将直接转换改为了5min转换，对检测结果没影响，但就是怕说乱改方法。
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