主题:【求助】液相色谱保留时间不稳定

浏览0 回复27 电梯直达
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ruifen0000
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是不是和柱温有关,安捷伦的加热模块我感觉受环境影响比较大
tzq81
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bonly10
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原文由 hyhy303(hyhy303) 发表:
实验室最近新购了一台安捷伦的液相色谱,走标准样品数针压力线很一致,保留时间却完全不一样,后面进的样保留时间都会靠前一些,大家帮忙解释一下这个现象会事什么原因导致的呀?我们使用的流动相是乙腈和纯水,仪器和溶剂都是新购的。
听说液相色谱在流动相的维护方面尤其要注意,稍不注意就可以导致仪器工作不正常,各位有丰富经验的大侠请多多指点,本人液相色谱的经验很少,各位请不吝赐教~

环境温度26度,柱温30度,流动相在线混合的。很纠结,今天上午又做了实验,保留时间又变成往后移了。
在开始实验之前我们已经对每一个通路排气泡了,然后用乙腈清洗系统近一个小时,再调用检测方法平衡了1个小时,结果保留时间还是波动~
谱图附后

楼主的问题解决了吗?既然排除了平衡时间不够的问题,就把溶剂瓶里的溶剂过滤头换一下,再试试吧,可能是堵了。还不行就检查一下比例阀有没有问题了,这两种可能性都比较大,逐个排除一下。
zhangrui329
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平衡的时候先用纯乙腈平衡5min(冲柱子),再用需要进样的梯度平衡15min左右,再进样。
我猜是楼主平衡的时候用的流动相比例不对,导致柱内流动相成分跟测定时条件不一致,最终保留时间不确定。
xhwy2010
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楼主可以将梯度条件修改一下试试:需要的峰都出来之后返回初始流动相多平衡一段时间,也就是最后的平衡时间增加一些。
sanbu830317
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不知道问题解决没有啊?是不是梯度设置出了问题啊,可以换等度试一试
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