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主题：【求助】HPLC测定丙戊酸钠血药浓度的疑问

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hiyvon

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发表于：2012/03/22 10:54:06 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

医院要开展hplc测定丙戊酸钠血药浓度，正在摸索方法，看文献都懵了
1、几乎血药浓度监测的所有文献都提到用柱前衍生法，原因何在？
如果是因为羧酸的紫外吸收在203nm，那么用截止波长较低的乙腈190nm做流动相不可以吗？

2、衍生化时三乙胺作为催化剂和改性试剂，浓度应为多少？我看文献有的用0.05%，有的高达10%。一定要用乙腈稀释吗？浓度太高会不会对柱子影响很大？进样前还要不要再测一下PH值？

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2012/3/22 11:07:58 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1、要衍生一般用的是紫外检测器或荧光检测器，如果不衍生灵敏度太低，检测不到低浓度的丙戊酸钠。可以使用乙腈，但使用203nm可能存在基线波动大，杂质干扰多，对前处理要求比较高。
2、你的流动相是什么，如果是缓冲体系问题不大，用多少的三乙胺合适你完全可以通过实验验证一下。

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2012/3/22 11:08:23 Last edit by xky0230699

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2012/3/22 11:13:16 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 hiyvon(hiyvon) 发表:
医院要开展hplc测定丙戊酸钠血药浓度，正在摸索方法，看文献都懵了
1、几乎血药浓度监测的所有文献都提到用柱前衍生法，原因何在？
如果是因为羧酸的紫外吸收在203nm，那么用截止波长较低的乙腈190nm做流动相不可以吗？

2、衍生化时三乙胺作为催化剂和改性试剂，浓度应为多少？我看文献有的用0.05%，有的高达10%。一定要用乙腈稀释吗？浓度太高会不会对柱子影响很大？进样前还要不要再测一下PH值？

衍生不光是波长的问题，还有个吸光度的问题，如果吸收系数很小的话，浓度低的检测限就不好。

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