主题:【求助】请教大家有关多肽样品色谱柱吸附问题

浏览0 回复3 电梯直达
050241310
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我们在用waters Symmetryshield  RP18 做多肽样品时(这个柱子是个小孔径的,在筛选柱子时这根柱子分离效果较好,所以选用),一根新柱子做一段时间后,有关物质的自身对照溶液主峰面积就会很小,跟未稀释的样品溶液主峰面积不成比例,就是柱子会吸附多肽样品,这个问题曾咨询过waters工程师,他们说过一些冲洗柱子的方法,比如用TFA体系的流动相水相和有机相梯度冲洗,试过这些方法,效果不是很好,不知道大家有没碰到过类似的问题,有什么好的办法来解决柱吸附的问题,谢谢各位!
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tangtang
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每次测定之后用梯度洗脱把吸附的多肽冲洗出来吧。

多肽测定一般是不是要用300A的柱子?
050241310
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一般是300A的,在方法梯度里是会设置冲洗的,但是没什么用,
mengqiangvictor
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首先要确定你柱子有没有选对,孔径,粒径等、
其次要判断到底有多少吸附
waters工程师说的没有错,一定要选择合适的流动相体系,做完样品,一定要大体积有机相冲洗色谱柱
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