主题:【求助】基线不稳,锯齿样

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ericwong
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原文由 nini2006(nini2006) 发表:
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这是不进样,分离缓冲液的图260nm。冲洗时间1M NAOH延长到1小时了。电压还是30KV,电流在100。帮忙分析下呗。谢谢啦。
明天我再试下10KV电压。
首先,基线爆高,不解。另外,这个这个基线不算不平。这个所谓“锯齿”是对比放大得出的效果。你再发个有峰的图来看看。

可是分析之后,基线突然升高,确实很奇怪。
楼主只是在把溶液放置好之后,只是施加分离电压进行分析吗?
ericwong
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另:楼主可以不用拍照,直接按下“Print Screen”键,即可将屏幕的图像复制到剪贴板,要比拍照的清晰。
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2012/5/10 8:36:30 Last edit by ericwong
nini2006
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原文由 lixuan20091225(lixuan20091225) 发表:
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别纠结于这个基线了,基线没啥问题。关键是你这峰完全没分开,还有就是先想办法把基线降下去,不然样品峰就会有被淹没的可能


不理解峰没分开的意思啊,那些峰峰不应该是样品峰么?
你的峰很胖,左边还突出,就是没分开的意思。至于260nm的图,只要你建立方法的时候设定260检测,完成检测后打开的谱图就自然会有。
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2012/5/10 13:58:03 Last edit by nini2006
cpudaxiao
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电流走成这个样子什么也不能分析的,根本不准.PH太高了,硼砂析出了,换缓冲盐或换PH
该帖子作者被版主 nini20062积分, 2经验,加分理由:感谢积极答疑
lixuan20091225
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别纠结于这个基线了,基线没啥问题。关键是你这峰完全没分开,还有就是先想办法把基线降下去,不然样品峰就会有被淹没的可能


不理解峰没分开的意思啊,那些峰峰不应该是样品峰么?
你的峰很胖,左边还突出,就是没分开的意思。至于260nm的图,只要你建立方法的时候设定260检测,完成检测后打开的谱图就自然会有。


不是的,上面那个图的样品只有适配子(小片段单链核酸)一种物质。貌似核酸峰是这个样子吧?我不太懂的,呵呵
lixuan20091225
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原文由 ericwong(ericwong) 发表:
另:楼主可以不用拍照,直接按下“Print Screen”键,即可将屏幕的图像复制到剪贴板,要比拍照的清晰。


thank you!我懒得用U盘考,就拍下来了,呵呵。

另外,我的总体积是30ul。

就是冲洗完直接分离的结果。
lixuan20091225
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原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
电流走成这个样子什么也不能分析的,根本不准.PH太高了,硼砂析出了,换缓冲盐或换PH


电流在100mA,还挺平稳的。
cpudaxiao
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原文由 lixuan20091225(lixuan20091225) 发表:
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电流走成这个样子什么也不能分析的,根本不准.PH太高了,硼砂析出了,换缓冲盐或换PH


电流在100mA,还挺平稳的。


一般基线走成这样是缓冲液和管壁没有平衡好的缘故,可以尝试着更换磷酸盐体系的缓冲液,你的PH是NAOH调的?还是硼酸调的?这个很关键。
该帖子作者被版主 nini20065积分, 2经验,加分理由:鼓励积极答疑
lixuan20091225
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用NAOH调的。
现在我的血清峰和核酸峰出现的时间差不多,混在一起时,基本上游离的核酸峰全部被血清结合峰融合了,区分不开来。电压,缓冲液的浓度、PH需要进一步优化,还有其他的需要改善么?
ericwong
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电流走成这个样子什么也不能分析的,根本不准.PH太高了,硼砂析出了,换缓冲盐或换PH


电流在100mA,还挺平稳的。


一般基线走成这样是缓冲液和管壁没有平衡好的缘故,可以尝试着更换磷酸盐体系的缓冲液,你的PH是NAOH调的?还是硼酸调的?这个很关键。

如果用磷酸盐体系,需要平衡的时间更长。
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