主题：【求助】C18固相萃取小柱上样时，样品只能用水溶解吗？

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:
RT，因为我的样品是非极性的，我溶解在甲醇里面，我可以直接在C18的固相萃取小柱上上样吗

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:
RT，因为我的样品是非极性的，我溶解在甲醇里面，我可以直接在C18的固相萃取小柱上上样吗

因为一般上样液体积不会很大，感觉用甲醇也可以，只是洗脱液如果还用甲醇，那可能除杂质效果很有限，因为强极性的溶剂把杂质也跟进着目标物一齐洗脱下来了。

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:
RT，因为我的样品是非极性的，我溶解在甲醇里面，我可以直接在C18的固相萃取小柱上上样吗

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:
RT，因为我的样品是非极性的，我溶解在甲醇里面，我可以直接在C18的固相萃取小柱上上样吗

因为一般上样液体积不会很大，感觉用甲醇也可以，只是洗脱液如果还用甲醇，那可能除杂质效果很有限，因为强极性的溶剂把杂质也跟进着目标物一齐洗脱下来了。

因为我是第一次用，也不知道该怎么弄，晚上看了一下别人的操作，也是看的是懂非懂的，那么我想请教你一下，我的实验顺序是这样子的。因为我是从黄瓜里提取我这种农药，是非极性的，我现在是溶解在甲醇里面，我是这样打算做的，C18先用甲醇活化，3倍柱床体积，流速设置为3ml/min, 然后是3倍柱床体积的水平衡，同样是这个流速，接着是上样，我不知道是一起倒进去，还是也是设置流速慢慢流进去啊？再接着是用5%甲醇+95%的水，10倍柱床体积，1mi/min冲洗（我觉得这一步是除杂），最后，用4倍柱床体积的50%甲醇+50%乙腈，1mi/min洗脱我要的目标物。我感觉冲洗是为了除杂，洗脱是为了获得我的目标物吧，但是我怎么觉得您说的是好像冲洗不是为了除杂，你的意思是杂志一直在柱子上，根本就没下来吗？还有，我想问一下，每一步都需要抽干吗？问了这么多问题，实在是麻烦你了

原文由 戈壁明珠(zongguitang) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:
RT，因为我的样品是非极性的，我溶解在甲醇里面，我可以直接在C18的固相萃取小柱上上样吗

因为一般上样液体积不会很大，感觉用甲醇也可以，只是洗脱液如果还用甲醇，那可能除杂质效果很有限，因为强极性的溶剂把杂质也跟进着目标物一齐洗脱下来了。

因为我是第一次用，也不知道该怎么弄，晚上看了一下别人的操作，也是看的是懂非懂的，那么我想请教你一下，我的实验顺序是这样子的。因为我是从黄瓜里提取我这种农药，是非极性的，我现在是溶解在甲醇里面，我是这样打算做的，C18先用甲醇活化，3倍柱床体积，流速设置为3ml/min, 然后是3倍柱床体积的水平衡，同样是这个流速，接着是上样，我不知道是一起倒进去，还是也是设置流速慢慢流进去啊？再接着是用5%甲醇+95%的水，10倍柱床体积，1mi/min冲洗（我觉得这一步是除杂），最后，用4倍柱床体积的50%甲醇+50%乙腈，1mi/min洗脱我要的目标物。我感觉冲洗是为了除杂，洗脱是为了获得我的目标物吧，但是我怎么觉得您说的是好像冲洗不是为了除杂，你的意思是杂志一直在柱子上，根本就没下来吗？还有，我想问一下，每一步都需要抽干吗？问了这么多问题，实在是麻烦你了

楼主，C18小柱活化时甲醇和水是分先后加入小柱的，不是同时加进去，等水快过完时开始上样，控制流速。淋洗和洗脱的溶剂是可以的，不过具体组分和杂质谁先离开柱子要看两者的极性，谁的极性强谁就先离开小柱。非极性组分有较强的保留。

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:

原文由 戈壁明珠(zongguitang) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:
RT，因为我的样品是非极性的，我溶解在甲醇里面，我可以直接在C18的固相萃取小柱上上样吗

因为一般上样液体积不会很大，感觉用甲醇也可以，只是洗脱液如果还用甲醇，那可能除杂质效果很有限，因为强极性的溶剂把杂质也跟进着目标物一齐洗脱下来了。

因为我是第一次用，也不知道该怎么弄，晚上看了一下别人的操作，也是看的是懂非懂的，那么我想请教你一下，我的实验顺序是这样子的。因为我是从黄瓜里提取我这种农药，是非极性的，我现在是溶解在甲醇里面，我是这样打算做的，C18先用甲醇活化，3倍柱床体积，流速设置为3ml/min, 然后是3倍柱床体积的水平衡，同样是这个流速，接着是上样，我不知道是一起倒进去，还是也是设置流速慢慢流进去啊？再接着是用5%甲醇+95%的水，10倍柱床体积，1mi/min冲洗（我觉得这一步是除杂），最后，用4倍柱床体积的50%甲醇+50%乙腈，1mi/min洗脱我要的目标物。我感觉冲洗是为了除杂，洗脱是为了获得我的目标物吧，但是我怎么觉得您说的是好像冲洗不是为了除杂，你的意思是杂志一直在柱子上，根本就没下来吗？还有，我想问一下，每一步都需要抽干吗？问了这么多问题，实在是麻烦你了

楼主，C18小柱活化时甲醇和水是分先后加入小柱的，不是同时加进去，等水快过完时开始上样，控制流速。淋洗和洗脱的溶剂是可以的，不过具体组分和杂质谁先离开柱子要看两者的极性，谁的极性强谁就先离开小柱。非极性组分有较强的保留。

我想我的药品可以溶解在乙腈里面，再用5%的甲醇加95%的水洗脱，这样我就可以达到除杂的效果了吧？

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:
RT，因为我的样品是非极性的，我溶解在甲醇里面，我可以直接在C18的固相萃取小柱上上样吗

因为一般上样液体积不会很大，感觉用甲醇也可以，只是洗脱液如果还用甲醇，那可能除杂质效果很有限，因为强极性的溶剂把杂质也跟进着目标物一齐洗脱下来了。

因为我是第一次用，也不知道该怎么弄，晚上看了一下别人的操作，也是看的是懂非懂的，那么我想请教你一下，我的实验顺序是这样子的。因为我是从黄瓜里提取我这种农药，是非极性的，我现在是溶解在甲醇里面，我是这样打算做的，C18先用甲醇活化，3倍柱床体积，流速设置为3ml/min, 然后是3倍柱床体积的水平衡，同样是这个流速，接着是上样，我不知道是一起倒进去，还是也是设置流速慢慢流进去啊？再接着是用5%甲醇+95%的水，10倍柱床体积，1mi/min冲洗（我觉得这一步是除杂），最后，用4倍柱床体积的50%甲醇+50%乙腈，1mi/min洗脱我要的目标物。我感觉冲洗是为了除杂，洗脱是为了获得我的目标物吧，但是我怎么觉得您说的是好像冲洗不是为了除杂，你的意思是杂志一直在柱子上，根本就没下来吗？还有，我想问一下，每一步都需要抽干吗？问了这么多问题，实在是麻烦你了

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:
RT，因为我的样品是非极性的，我溶解在甲醇里面，我可以直接在C18的固相萃取小柱上上样吗

因为一般上样液体积不会很大，感觉用甲醇也可以，只是洗脱液如果还用甲醇，那可能除杂质效果很有限，因为强极性的溶剂把杂质也跟进着目标物一齐洗脱下来了。

因为我是第一次用，也不知道该怎么弄，晚上看了一下别人的操作，也是看的是懂非懂的，那么我想请教你一下，我的实验顺序是这样子的。因为我是从黄瓜里提取我这种农药，是非极性的，我现在是溶解在甲醇里面，我是这样打算做的，C18先用甲醇活化，3倍柱床体积，流速设置为3ml/min, 然后是3倍柱床体积的水平衡，同样是这个流速，接着是上样，我不知道是一起倒进去，还是也是设置流速慢慢流进去啊？再接着是用5%甲醇+95%的水，10倍柱床体积，1mi/min冲洗（我觉得这一步是除杂），最后，用4倍柱床体积的50%甲醇+50%乙腈，1mi/min洗脱我要的目标物。我感觉冲洗是为了除杂，洗脱是为了获得我的目标物吧，但是我怎么觉得您说的是好像冲洗不是为了除杂，你的意思是杂志一直在柱子上，根本就没下来吗？还有，我想问一下，每一步都需要抽干吗？问了这么多问题，实在是麻烦你了

不知道您做的是什么农药项目？

柱活化后上样时就是那么不断地加（只要柱管体积允许），设置好洗速（连滴不成线）就可以了。

您这个洗脱方法比较麻烦，您查查资料，如果乙腈上提取它没有问题还是用乙腈提取吧，把提取液上C18，用乙腈洗脱，然后浓缩除去乙腈，再进行其它的步骤就可以了。

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 qingqingchenxia(qingqingchenxia) 发表:
RT，因为我的样品是非极性的，我溶解在甲醇里面，我可以直接在C18的固相萃取小柱上上样吗

因为一般上样液体积不会很大，感觉用甲醇也可以，只是洗脱液如果还用甲醇，那可能除杂质效果很有限，因为强极性的溶剂把杂质也跟进着目标物一齐洗脱下来了。

因为我是第一次用，也不知道该怎么弄，晚上看了一下别人的操作，也是看的是懂非懂的，那么我想请教你一下，我的实验顺序是这样子的。因为我是从黄瓜里提取我这种农药，是非极性的，我现在是溶解在甲醇里面，我是这样打算做的，C18先用甲醇活化，3倍柱床体积，流速设置为3ml/min, 然后是3倍柱床体积的水平衡，同样是这个流速，接着是上样，我不知道是一起倒进去，还是也是设置流速慢慢流进去啊？再接着是用5%甲醇+95%的水，10倍柱床体积，1mi/min冲洗（我觉得这一步是除杂），最后，用4倍柱床体积的50%甲醇+50%乙腈，1mi/min洗脱我要的目标物。我感觉冲洗是为了除杂，洗脱是为了获得我的目标物吧，但是我怎么觉得您说的是好像冲洗不是为了除杂，你的意思是杂志一直在柱子上，根本就没下来吗？还有，我想问一下，每一步都需要抽干吗？问了这么多问题，实在是麻烦你了

不知道您做的是什么农药项目？

柱活化后上样时就是那么不断地加（只要柱管体积允许），设置好洗速（连滴不成线）就可以了。

您这个洗脱方法比较麻烦，您查查资料，如果乙腈上提取它没有问题还是用乙腈提取吧，把提取液上C18，用乙腈洗脱，然后浓缩除去乙腈，再进行其它的步骤就可以了。