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主题：【求助】色谱柱替代的问题

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jiaodandan
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发表于：2012/08/23 16:16:59 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位从事研发行业的版友，我最近接到一个新的产品的方法开发，参考了别人家的分析条件。
别家：色谱柱为月旭C18(4.6*150,5um)、
A相为0.025%TFA的20%乙腈、
B相为0.025%TFA的乙腈、
T      0            60          60.1        75
                                                                                                                                                                               
B    10          60          10          10
样品浓度为1mg/ml、进样量为20ul
目前我将其中的色谱柱替换为agilent  SB-C18 其余不变，为什么我的峰宽有5min，这两家的色谱柱差别有那么大吗？
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有水有渝
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2012/8/23 16:34:13 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
把进样量减小或样品浓度降10倍试试
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jiaodandan
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2012/8/23 16:37:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
把进样量减小或样品浓度降10倍试试

嗯，明天白天我再来试下。
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秋醉虞阳
wangjianhua1102
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2012/8/23 16:54:07 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不同牌子柱子还是有差别的
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jiaodandan
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2012/8/24 9:58:51 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 jiaodandan(jiaodandan) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
把进样量减小或样品浓度降10倍试试

嗯，明天白天我再来试下。

还是不行，柱效很差，怀疑色谱柱自身不太好了，准备更换Thermo的C18柱再试下。
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houjjun
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2012/8/27 21:14:49 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能是浓度太大了，稀释1000倍试试
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richies
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2012/8/28 8:44:14 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果浓度大,不仅峰宽了,峰高也会满值啊

如果确认柱子没问题,出现这样的事情,一般是PH的问题,不同的柱子对PH的敏感度是不一样的,这个就是柱子的差异性

别说不同品牌的柱子,就是同品牌,不同批次的柱子,都有这个问题
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jiaodandan
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2012/8/28 12:00:22 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 richies(richies) 发表:
如果浓度大,不仅峰宽了,峰高也会满值啊

如果确认柱子没问题,出现这样的事情,一般是PH的问题,不同的柱子对PH的敏感度是不一样的,这个就是柱子的差异性

别说不同品牌的柱子,就是同品牌,不同批次的柱子,都有这个问题

呵呵，我用的agilent1260 EZchrom的软件，1mg/ml的浓度进样量为20ul，峰高只有400多，而峰面积确是10位数，我现在是自己开发一个拥有4个手型C原子的化合物，它们的极性非常靠近，想用C18柱将它们分开！有办法吗？
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仰望天空的鱼
zc3205
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2012/8/29 10:57:12 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
相同填料的色谱柱的粒径、键合方式等对保留行为都有影响，最好找一个各个方面都差不多的来做
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jiaodandan
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2012/8/29 16:05:02 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天买了根YMC PACK PRO C18  150*6.0，5.0um的色谱柱明天再试试看！再不能分开这些同分异构体就再跟换流动相了！
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小虾米
wuxia330
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2012/11/3 11:23:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
调调浓度应该有点改观
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