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液相色谱（LC）
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主题：【求助】液相色谱图物质分不开

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fenseyouyu
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发表于：2012/09/23 15:04:40 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位，我周五 在分析一种新产品的时候，出现了这种情况，我知道产品的原料和产品都是极性很大的物质，我开始选用三氟乙酸的水溶液和乙腈做流动相，进行梯度处理，分离效果很不好，而且两分钟就出峰了，后来我改用磷酸二氢钾的水溶液，可出峰的效果还是差不多，几乎没什么变化，还有我用的是RP18的色谱柱，应该而言，分离情况应该会挺好的，可就是这种情况，我不知道我因为峰没有分开还是物质的原因，求解
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2012/9/23 17:41:31 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
极性大的用RP18保留不好，出峰较快。跑梯度都分不开，估计就分不开了。如果是疏水物质，可以用正相色谱；如果是亲水性物质，尝试一下hilic的色谱柱
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houjjun
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2012/9/23 18:32:39 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
乙腈比列变小一些试一下
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秋醉虞阳
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2012/9/23 21:02:52 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
三氟乙酸的水溶液和乙腈中乙腈的比例改小。不知道流速是多少
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nature2009
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2012/9/23 21:27:56 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做一针空白，排除是不是溶剂峰。如不是，减少有机相比例。或更换色谱柱，最好是适于极性物质分离的色谱柱。
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fenseyouyu
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2012/9/23 21:57:26 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 houjjun(houjjun) 发表:
乙腈比列变小一些试一下
  用了啊！还是不行，因为我用的梯度就是调节乙腈的比例的，但是还是分不开的
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fenseyouyu
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2012/9/23 21:58:55 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 秋醉虞阳(wangjianhua1102) 发表:
三氟乙酸的水溶液和乙腈中乙腈的比例改小。不知道流速是多少
  还是不行的，我分别用0.02%的三氟乙酸和0.1%的三氟乙酸，都是没什么变化
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2012/9/23 22:00:57 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 makeawishn70(makeawishn70) 发表:
极性大的用RP18保留不好，出峰较快。跑梯度都分不开，估计就分不开了。如果是疏水物质，可以用正相色谱；如果是亲水性物质，尝试一下hilic的色谱柱
至于是不是亲水性和疏水性的我还得去查查看，我也不知道，hilic的柱子我们没有，有没有相似的柱子？
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fenseyouyu
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2012/9/23 22:02:45 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nature2009(nature2009) 发表:
做一针空白，排除是不是溶剂峰。如不是，减少有机相比例。或更换色谱柱，最好是适于极性物质分离的色谱柱。

空白做了，不是溶剂峰，分离极性的物质，我看了一下C18可以用啊，RP18不是在C18的基础上改进的嘛，应该会比C18强啊！可还是不行
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2012/9/23 22:03:47 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 秋醉虞阳(wangjianhua1102) 发表:
三氟乙酸的水溶液和乙腈中乙腈的比例改小。不知道流速是多少
  流速是1.0ml/min 的流速
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秋醉虞阳
wangjianhua1102
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2012/9/23 22:32:12 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般分离不开主要也就色谱柱和流动相的问题，找合适的色谱柱和流动相或进行梯度。色谱柱柱效不好也可能导致分离效果不佳。
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