主题:【第六届原创】虞阳讲堂—茶多酚检测方法探究

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秋醉虞阳
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        茶多酚(Tea Polyphenols)又称茶鞣或茶单宁,是茶叶中多酚类物质的总称,包括儿茶素、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。在这四类物质中,儿茶素含量最高,占茶多酚总量的60%-80%。它不仅是一种新型的天然抗氧化剂,还具有明显的抗衰老、消除人体过剩的自由基,去脂减肥,降低血糖、血脂和胆固醇,预防心血管疾病,抑制肿瘤细胞等药理功能,在食品加工、医药、日用化工等领域具有重要的应用。

1材料和设备

1.1样品

        茶粉取值浙江某茶多酚生产企业。

1.2试剂

        酒石酸钾钠、磷酸亚铁、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、甲醇、福林酚试剂、没食子酸、碳酸钠。上述所有试剂为分析纯(AR),所用水均为重蒸馏水。

1.3仪器

        分析天平(精度0.001g)、VIS7200可见分光光度计、UV2450紫外分光光度计

2 测定及检测方法

        测定步骤参照QB 2154-1995《食品添加剂 茶多酚》 、GB/T8313-2008《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》 。

3结果

3.1 GB/T8313-2008标准工作曲线建立
      根据GB/T8313-2008标准建立没食子酸标准工作曲线见表3.1和图3.1,以为3.2茶多酚计算提供方便。

3.1没食子酸标准工作溶液测定结果

没食子酸浓度(μg/ml

10.3181

20.6362

30.9543

41.2724

51.5905

吸光度(A)

0.116

0.117

0.235

0.233

0.357

0.353

0.48

0.477

0.604

0.601



3.2样品检测结果

        根据行标和08版国标方法我们对样品进行了检测,结果如下表3.2。

3.2检测结果对照表

样品

茶多酚含量(%)

茶多酚检测差异(%



QB 2154-1995


GB/T8313-2008

1号样

20.69

12.22

40.94

2号样

42.15

37.12

11.93

3号样

82.75

70.75

14.50

4号样

77.50

57.77

25.46

5号样

92.25

76.23

17.37

6号样

98.07

76.01

22.49

7号样

101.20

80.42

20.53

8号样

102.33

78.97

22.83

9号样

106.40

84.19

20.87

10号样

106.90

80.98

24.25

11号样

108.99

81.99

24.77

12号样

115.16

82.65

28.23


4讨论

4.1茶多酚检测方法分析

        QB 2154-1995《食品添加剂 茶多酚》和GB/T8313-2002《茶 茶多酚测定》用的都是酒石酸亚铁法,此法简单快速,重现性良好,而且显色稳定。其反应原理是,利用多酚类物质中酚羟基能与亚铁离子生成蓝紫色络合物特性,波长540nm处测定茶多酚。但是茶多酚并非单一的化合物,而是多种多酚类物质的总称,各种多酚物质与亚铁离子络合后颜色不完全相同,对于复杂成分的多酚物质并不适用。此法另一缺点就是对高含量的茶多酚检测结果表述能达到100%以上,如上表3.2所示。

        GB/T8313-2008 《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》是对GB/T8313-2002 《茶 茶多酚测定》修订,但阅读两标准不难发现08版的检测方法几乎完全不同于02版。02版是采用离子螯合法,08版则采用氧化还原法,原理:福林酚试剂(Folin-Ciocaileu)在碱性环境下氧化茶多酚中-OH基团而自身显蓝色,最大吸收波长为765nm测茶多酚。此法相对于酒石酸亚铁法试剂配制麻烦,耗时长,重现性也不如酒石酸亚铁法,样品中若含有蛋白质、柠檬酸和巯基化合物,均有干扰作用。
两者的具体检测方法的不同可参见杨士新的《茶多酚检测 新标准带来了新问题》

4.2 茶多酚检测结果对比

        表3.2检测结果显示QB 2154-1995标准比08版标准检测的茶多酚含量高5.03%—32.51%个点,平均差比为22.85%。新国标检测结果茶多酚含量在100%以内,这显示新国标测高含量茶多酚更符合检测结果。

4.3 方法适用性探讨

        目前很多茶多酚企业仍在沿用行业标准QB 2154-1995,主要原因是此法检测快捷,而且行标中标准曲线在业界已有默认值常值2.884,对于企业来说行标更适合工业化大生产。
        为了更好的和国际接轨,国家不断改进方法,GB/T8313-2008标准就孕育而生。虽然目前来说可能检测程序仍比较繁琐,但随着科研所和企业不断的改进技术,该法会逐渐推广。
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原文由 给力芬(huojuncai) 发表:
这不是以前的加热回流提取茶多酚的??

你说的是索氏提取法提取咖啡因的
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原文由 给力芬(huojuncai) 发表:
这不是以前的加热回流提取茶多酚的??

工业提取咖啡因不采用索氏提取法,此法繁琐,不宜大规模生产。
tangtang
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原文由 tangtang(tangtang) 发表:
有HPLC法测定茶多酚中的儿茶素的。

糖糖做过?GB8313里就有液相
影子
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原文由 秋醉虞阳(wangjianhua1102) 发表:
原文由 tangtang(tangtang) 发表:
有HPLC法测定茶多酚中的儿茶素的。

糖糖做过?GB8313里就有液相

有了HPLC法为什么还要开发UV方法呢?UV好象不是首选啊
tangtang
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原文由 秋醉虞阳(wangjianhua1102) 发表:
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有HPLC法测定茶多酚中的儿茶素的。

糖糖做过?GB8313里就有液相


没做过,UV法的适用性要差一点。
tangtang
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有HPLC法测定茶多酚中的儿茶素的。

糖糖做过?GB8313里就有液相

有了HPLC法为什么还要开发UV方法呢?UV好象不是首选啊


可能是考虑成本吧,而且从数据来看,08版的结果可能也足够准确了。
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