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凝胶色谱（GPC）
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主题：【讨论】如何建立GPC的检量线，

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yusualex
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发表于：2012/10/30 10:06:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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各位大侠：
        小弟刚接手GPC，不知道如何建立检量线，我们测得是PC+ABS的分子量和数均分布，
有一组标样，但是不知道分别称多少，定容多少，是单个溶解，还是混合溶解？请诸位帮帮忙
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小不董
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2012/10/30 14:35:38 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yusualex(yusualex) 发表:
各位大侠：

        小弟刚接手GPC，不知道如何建立检量线，我们测得是PC+ABS的分子量和数均分布，
有一组标样，但是不知道分别称多少，定容多少，是单个溶解，还是混合溶解？请诸位帮帮忙


GPC和其他的检出限有点差别， 检出的分子量大小很大取决于你柱子的性能，首先你要查看你使用的凝胶色谱柱的排阻体积（分子量范围）是多少。也就是你能分析的最大分子量和最小分子量。
再就分析或测定标样或样品时，一般为1g/ml，分子量大的样品浓度适量减小没，分子量小的浓度增大，信号小的浓度适当提高，信号强的浓度尽量降低。定容多少自己决定，多了费溶剂，少了，称量不准。
标样的溶解，最好是单标，彼此之间的影响就减少了，若要混标，两个混标的分子量至少间隔一个数量级以上。
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histone1
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2012/10/31 11:02:09 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的配置是什么，如果是RI，只需要考虑浓度；如果IR + Vis，还需要考虑标样的分子量。

你可以先配一个标样，配一个浓度，进样，看出峰情况；峰大了就降低浓度，峰小了就增加浓度。

通常情况，标样配个5ml或10ml就足够了。
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小不董
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2012/11/3 10:13:17 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 histone1(histone1) 发表:
你的配置是什么，如果是RI，只需要考虑浓度；如果IR + Vis，还需要考虑标样的分子量。

你可以先配一个标样，配一个浓度，进样，看出峰情况；峰大了就降低浓度，峰小了就增加浓度。

通常情况，标样配个5ml或10ml就足够了。


histone，请教下，你配置5ml或10ml是怎么配置的？取5-10mg？10万分之一的天平也称不准呀。我一直纳闷，现在我用激光光散射，要求浓度很准确，不知道如何准确定量更方便合理，使用溶剂也少。
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histone1
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2012/11/4 17:38:25 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
精确到0.1mg的天平就可以了，浓度为5-10mg/ml的标准样品，配制5ml，需要25-50mg表样，这是能称准的。

如果怕不准，还有预先称好质量的装在瓶中的标样，用之前加溶剂即可。
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