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凝胶色谱（GPC）

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主题：【讨论】GPC如何得到分子量分布？

浏览0 回复13 电梯直达

weijianming

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发表于：2013/07/12 22:30:23 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

悬赏金额：10积分状态：未解决

GPC送样分析，拿到了数据，横坐标是时间，纵坐标是Mv。请问如何处理数据才能得到分子量大小的分布呢？谢谢！

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2013/7/13 9:10:48 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

需要有分子量标准品来做对照的啊

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weijianming

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2013/7/13 17:05:37 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

您好，也拿到了标样聚苯乙烯的数据。怎么进行处理呢？谢谢啊！

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小不董

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ID：doxw0323

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2013/7/14 10:02:20 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

需要一个数据处理软件,不晓得你用那家的仪器分析得到的数据，一般GPC软件都能认识大多普遍的数据。先用一系列标准物质（窄分布的居多）的色谱数据作一条标准曲线，再用这个曲线分析目标物质的分子量分布。
你说的横坐标是保留时间，也可换算成洗脱体积。但纵坐标一般不会是Mv，应是单位，是相应信号。

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tigertooth

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2013/7/15 10:45:53 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一般软件都带分散度的计算功能。而且也不会给Mv对保留时间的图，一般是Mw.

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weijianming

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2013/7/15 22:52:15 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢各位啊
经过搜索，知道先要做标准曲线，使用标样的洗脱体积与其logMp作图，然后进行回归，得到曲线方程。之后怎么计算呢？
此外，给我的数据横坐标是时间，纵坐标是Mv（应该是电信号把），不是Mw。
保留时间与洗脱体积如何换算呢？
此外，标样只有4个分子量，是否可以呢？
再次谢谢！

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touda_mf

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2013/8/10 23:29:36 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这种一般让检测结构给你处理好的吧！得到标准曲线方程和样品GPC数据后，就用数据处理软件进行积分，调整积分区域，定量。积分一般分为窄分布和宽分布，窄分布可以给出每个峰的峰值分子量，一般是Mp（如果你做标准曲线也是用Mp的话），以及想要的峰面积百分含量等各种数据；宽分布则选择最高峰的Mp进行积分，也就是谱图上峰高最大的峰，对应的出峰时间，再对应回标准曲线中的该时间对应的标准曲线上的分子量Mp，其它Mn，Mw，Mz，分散度等都可以通过计算公式从Mp中转换过来！

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2013/8/10 23:32:30 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 weijianming(weijianming) 发表:
谢谢各位啊
经过搜索，知道先要做标准曲线，使用标样的洗脱体积与其logMp作图，然后进行回归，得到曲线方程。之后怎么计算呢？
此外，给我的数据横坐标是时间，纵坐标是Mv（应该是电信号把），不是Mw。
保留时间与洗脱体积如何换算呢？
此外，标样只有4个分子量，是否可以呢？
再次谢谢！

要看你分子量的分布范围，要是分子量范围比较小，也是没问题的！要是分子量的分布范围比较大，一般需要5-10个点。

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histone1

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2013/8/19 14:24:47 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 weijianming(weijianming) 发表:
谢谢各位啊
经过搜索，知道先要做标准曲线，使用标样的洗脱体积与其logMp作图，然后进行回归，得到曲线方程。之后怎么计算呢？
此外，给我的数据横坐标是时间，纵坐标是Mv（应该是电信号把），不是Mw。
保留时间与洗脱体积如何换算呢？
此外，标样只有4个分子量，是否可以呢？
再次谢谢！

你说对了，纵坐标应该是mv（毫伏）。

保留体积=保留时间*流速

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agl_wjh

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2013/9/27 9:01:38 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不管哪家，都是用标准样品（一般是聚苯乙烯）做标准曲线，然后才成看实验样品分子量分布的。

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忆青春

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2015/4/22 22:17:51 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 touda_mf(touda_mf) 发表:
这种一般让检测结构给你处理好的吧！得到标准曲线方程和样品GPC数据后，就用数据处理软件进行积分，调整积分区域，定量。积分一般分为窄分布和宽分布，窄分布可以给出每个峰的峰值分子量，一般是Mp（如果你做标准曲线也是用Mp的话），以及想要的峰面积百分含量等各种数据；宽分布则选择最高峰的Mp进行积分，也就是谱图上峰高最大的峰，对应的出峰时间，再对应回标准曲线中的该时间对应的标准曲线上的分子量Mp，其它Mn，Mw，Mz，分散度等都可以通过计算公式从Mp中转换过来！

您好，我想问下做好标准曲线后，测试样本得到曲线图，需要经过手动积分，得到分子量，这么做对吗？另外积分好后会出现Mn,Mp,Mw，哪儿个值代表我要的分子量值（标准曲线分子量用的Mp）

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