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主题：【讨论】两实验室间液相保留时间相差5分钟什么原因

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发表于：2012/10/30 16:34:04 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同一HPLC方法()在两个城市的实验室间进行测定，主峰出峰时间在约20min，两实验室间测定的主峰保留时间差异5分钟多，两个实验室间所用的试剂和色谱柱是同一个(使用的水不同，但都是去离子水)，色谱仪为Agilent 1200，实验也是同一实验人进行实验，实验环境(两实验室间温度差异在1摄氏度左右，湿度差异在10%左右)会导致这么大差异吗？是什么原因导致这么大的差别？谢谢讨论！

另外，法规有没有规定液相方法在实验室间转移时，保留时间需要一致，或者差异需控制在多少的范围？
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三人行
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2012/10/30 17:49:18 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最可能是水的问题，虽然都是去离子水，但使用的水不同，可能是水的pH值不同而导致保留时间差异。
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依旧
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2012/10/31 15:05:18 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是仪器的因素，仪器本身1ml/min 有很大区别俩仪器的流量肯定有差别
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老多_小多
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2012/10/31 15:18:01 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个跟被测物质也有关系，有的物质对PH、极性有很大的变化
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houjjun
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2012/10/31 19:14:48 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
两仪器系统的压力差的多不？
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houjjun
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2012/10/31 19:16:14 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
主要原因可能两点，1是仪器的流速，2是水的质量
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2012/11/1 11:54:22 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
最可能是水的问题，虽然都是去离子水，但使用的水不同，可能是水的pH值不同而导致保留时间差异。


去离子水都是密理博纯水仪处理得到的18.2M欧*厘米的水，不会有差别
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2012/11/1 11:55:22 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 依旧(17284539) 发表:
是仪器的因素，仪器本身1ml/min 有很大区别俩仪器的流量肯定有差别


仪器都是经过公司内部的计量部门校验过的
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2012/11/1 11:57:16 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:
这个跟被测物质也有关系，有的物质对PH、极性有很大的变化


被测物质是重组抗体蛋白，是离子交换色谱法检测的，会有这么大影响吗？
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2012/11/1 12:00:13 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 houjjun(houjjun) 发表:
两仪器系统的压力差的多不？


柱压100bar，相差2bar左右
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三人行
jncxyy2012
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2012/11/1 13:05:49 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能是流动相在抽滤过程中有轻微变化。
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