主题:【讨论】多肽有没有出M+6H的可能?

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steven_sela
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今天替别人测了个多肽物质,送样人说他的物质分子量2000多。给他用了甲醇:0.25%FA的流动相进的质谱,发现在385,578和1155出了分子量且三个数值都存在的倍数关系,估算它的分子量约为2309,但没有找到相应的分子离子峰。

由于送样时也没有告知准确分子量,如果真是2309的分子量,那385就是M+6H,我想问问各位多肽物质会有+6H的可能吗?我这么推算到底正不正确?还是说这个物质的分子量应为1154?

补充一点:1155这个分子峰的强度并不高
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sukiliang
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我们做一个多肽类抗生素的课题,做出来是M+3H

流动相是2g/L的甲酸和0.1%甲酸乙腈

期待专家解答
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2013/1/24 22:44:16 Last edit by sukiliang
edsion1999
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yzulcl
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如果是高分辨的质量分析器(比如TOF),直接看同位素峰的间隔就能知道电荷数。

估计你的是低分辨的质量分析器(Q或者Trap),那么想直接看出6价电荷数是不可能的了,除非你用的是离子阱,并且有ZoomScan的功能。

那就只能依靠后期的数据解析。

用电喷雾质谱分析一个多肽或者蛋白,一般来讲,分子量越大,pH越低,越容易得到高电荷数的离子。但是无论怎样,这个电荷数不是单一的,一定有一个分布,比如,同时出现2+、3+、4+等电荷数的离子。

既然你假设分子量是2309,那么385就是6+离子,578就是4+离子,1155就是2+离子。那么,按照一般的规律,应该也能发现5+离子(463)和3+离子(771),你的质谱图上有这两个离子吗?

如果,质谱图上只有385(386?)、578、1155这三个离子,我认为更合理的解释是分子量1154,这三个离子是3+、2+、1+离子。

做实验、做检测,不能他认为或者想要什么结果我们就一定要按照他的来。
实在不行,拿他的样品去做高分辨质谱吧。
该帖子作者被版主 nankingee5积分, 2经验,加分理由:新年快乐!
daoyuanli
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多肽出+6H的峰很正常,你用的什么质谱?
不能看电荷数么?
steven_sela
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原文由 steven_sela(steven_sela) 发表:
原文由 yzulcl(yzulcl) 发表:
如果是高分辨的质量分析器(比如TOF),直接看同位素峰的间隔就能知道电荷数。

估计你的是低分辨的质量分析器(Q或者Trap),那么想直接看出6价电荷数是不可能的了,除非你用的是离子阱,并且有ZoomScan的功能。

那就只能依靠后期的数据解析。

用电喷雾质谱分析一个多肽或者蛋白,一般来讲,分子量越大,pH越低,越容易得到高电荷数的离子。但是无论怎样,这个电荷数不是单一的,一定有一个分布,比如,同时出现2+、3+、4+等电荷数的离子。

既然你假设分子量是2309,那么385就是6+离子,578就是4+离子,1155就是2+离子。那么,按照一般的规律,应该也能发现5+离子(463)和3+离子(771),你的质谱图上有这两个离子吗?

如果,质谱图上只有385(386?)、578、1155这三个离子,我认为更合理的解释是分子量1154,这三个离子是3+、2+、1+离子。

做实验、做检测,不能他认为或者想要什么结果我们就一定要按照他的来。
实在不行,拿他的样品去做高分辨质谱吧。


您好,我分析器用的是TOF,主要是463这个峰不明显,埋的很低,至于771我找过,应该是没出。还有一点想请教一下,+6H的同位素峰间隔怎么看?是看同位素峰的比值?像H有2个同位素,我该以哪个为准?还是有其他的方法?这方面我不是很懂,请勿见笑
yzulcl
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同位素峰的质量数间隔是1。
如果电荷数是1,那么质荷比间隔就是 1/1 = 1;
如果电荷数是2,那么质荷比间隔就是 1/2 = 0.5;
如果电荷数是3,那么质荷比间隔就是 1/3 = 0.33;
如果电荷数是4,那么质荷比间隔就是 1/4 = 0.25;
如果电荷数是5,那么质荷比间隔就是 1/5 = 0.20;
如果电荷数是6,那么质荷比间隔就是 1/6 = 0.17;
……依此类推……

你的仪器在测试之前调好了吗? 分辨率多少? 质量轴矫正过了吗?

对于TOF来说,做这个是手到擒来的。
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2013/1/26 18:00:35 Last edit by yzulcl
steven_sela
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原文由 yzulcl(yzulcl) 发表:
同位素峰的质量数间隔是1。
如果电荷数是1,那么质荷比间隔就是 1/1 = 1;
如果电荷数是2,那么质荷比间隔就是 1/2 = 0.5;
如果电荷数是3,那么质荷比间隔就是 1/3 = 0.33;
如果电荷数是4,那么质荷比间隔就是 1/4 = 0.25;
如果电荷数是5,那么质荷比间隔就是 1/5 = 0.20;
如果电荷数是6,那么质荷比间隔就是 1/6 = 0.17;
……依此类推……

你的仪器在测试之前调好了吗? 分辨率多少? 质量轴矫正过了吗?

对于TOF来说,做这个是手到擒来的。


明白了,谢谢。仪器使用前我一般做一下校正
liufeilzu
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完全有可能啊,分子量越大越有可能,不过你的2000多,还有就是看他的氨基酸组成也有可能
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