高压梯度:流动相的混合是在高压下进行,所以该系统在硬件上需多台同样的输液泵的组合,而后经动态混合器进行混合,并有专用的软件模块进行控制。
优点是梯度精度较高,但缺点是成本较高,硬件较多
而流动相的可压缩性和流动相混合时的热力学体积的变化,可能影响输入到色谱柱的流动相的组成,所以,梯度的准确度会出现偏差,另外,高压梯度洗脱过程中为保证流速稳定必须使用恒流泵,否则很难获得很好的重复性结果。
低压梯度:流动相在低压下混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱,因此对硬件的要求较低,其梯度的实现主要由电磁阀的开关来进行控制,只需一台泵、一台容积组织器和一台动态混合器,即可配置成四元梯度系统。
优点是成本较低,系统的故障率较低,维护较为方便,此外,由于流动相是在常压下混合,不存在流动相的压缩,故而梯度准确度较好。缺点是精度比高压梯度略差。
从硬件价格上看,高压比低压贵。
无论是哪种,流动相最好都预先脱气处理。但,在同样的两种流动相混合时,高压混合所产生的气泡几率要比低压混合时少(理由可以看看6楼兄弟说的)。
而一般仪器的脱气都是在混合前,至于8楼说的混合再脱气,没见到过。