主题:【已应助】液质联用做不出布洛芬的信号是咋回事?

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zyh87_
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液质联用检测布洛芬。用65(乙腈):35(缓冲盐+0.2%的甲酸),用SRM扫描布洛芬的负离子碎片,试了好久,都做不出信号,不知道为啥?
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yzulcl
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做负离子,流动相里面不要加酸,水相里面只要加醋酸铵或者甲酸铵缓冲盐就行了,不要加甲酸,盐浓度也不要太高,一般10mM足够了,试试看吧。
chemist_zm
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zyh87_
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原文由 yzulcl(yzulcl) 发表:
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做负离子,流动相里面不要加酸,水相里面只要加醋酸铵或者甲酸铵缓冲盐就行了,不要加甲酸,盐浓度也不要太高,一般10mM足够了,试试看吧。


试过了,不加酸也不行
meigm
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加氨水可以试试,有次我也是负离子模式下找不到母离子,结果同事建议加了一点点氨水,结果找到了
yzulcl
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ESI 与反相 $$lc 是有一点点矛盾的:
ESI 要求样品最好是离子状态有利于质谱检测,反相 $$lc 要求样品最好是非解离状态有利于保留。

像布洛芬这种小分子的有机酸,流动相里面加点缓冲盐也就罢了,加氨水对于 RPHP$$lc-ESI-MS 的分析有一利和两害:

1、一利就是可以大大增强质谱的响应,提高质谱检测灵敏度。
2、第一害是流动相中的样品基本全部是离子状态,在反相色谱柱上基本不保留,差不多死时间就出峰了,不利于得到理想的分离效果。(对于含有苯环结构的化合物,可以试试苯基柱,也许比 C18 柱有更好的保留)
3、一般的反相色谱柱都是硅胶颗粒上面修饰碳链。就算厂家再怎么宣传可以耐受高 pH,长时间的高 pH 流动相的使用会大大缩短色谱柱的使用寿命。

对这种酸性或者碱性的小分子的有机物的 $$lc-MS 的分析可以考虑用 HILIC 色谱柱。
该帖子作者被版主 sukiliang4积分, 2经验,加分理由:好详细的解说
zyh87_
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原文由 yzu$$lcl(yzu$$lcl) 发表:
ESI 与反相 $$lc 是有一点点矛盾的:
ESI 要求样品最好是离子状态有利于质谱检测,反相 $$lc 要求样品最好是非解离状态有利于保留。

像布洛芬这种小分子的有机酸,流动相里面加点缓冲盐也就罢了,加氨水对于 RPHP$$lc-ESI-MS 的分析有一利和两害:

1、一利就是可以大大增强质谱的响应,提高质谱检测灵敏度。
2、第一害是流动相中的样品基本全部是离子状态,在反相色谱柱上基本不保留,差不多死时间就出峰了,不利于得到理想的分离效果。(对于含有苯环结构的化合物,可以试试苯基柱,也许比 C18 柱有更好的保留)
3、一般的反相色谱柱都是硅胶颗粒上面修饰碳链。就算厂家再怎么宣传可以耐受高 pH,长时间的高 pH 流动相的使用会大大缩短色谱柱的使用寿命。

对这种酸性或者碱性的小分子的有机物的 $$lc-MS 的分析可以考虑用 HILIC 色谱柱。


多谢支持!
yll120166
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这个布洛芬不适合用质谱做,通常含羧基,羟基,氮原子的化合物容易做质谱,不论是正离子模式还是负离子模式。布洛芬,我猜,会有负离子的一级谱,但响应非常不好,基本得不到二级碎片,或没有稳定的二级碎片。你看他的分子结构,即使有二氧化碳中性丢失,剩下的哪里还能容得下稳定的碳负离子存在?
hnteng
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加一点点氨水或醋酸氨,应该都可以出峰。
  
  加甲酸是绝对不对的。

  如楼上所说,液质联用与普通液相是不同的。物质要易于离子化才能在质谱中响应。而普通液相就是离子抑制。恰好是相反的。
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