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主题：【讨论】他山之石——酶标仪灵敏度指标中吸光度值一般多少？

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刘彦刚
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发表于：2013/03/28 04:23:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
他山之石——张博士说：
    根据规程JJG 861-2007酶标分析仪检定规程，灵敏度≥0.01，所用浓度为5mg/L，则测得的吸光度不得小于0.05。我偷懒，没有做过这个指标，也没配过这个溶液。

只能参照【杨青成，酶标仪校准方法探讨，临床血液学杂志，2011，２4（４）】中，溶液厚度为5mm、浓度为0.0313%的重铬酸钾吸光度值是0.222，则假设厚度相同，换算成5mg/L重铬酸钾浓度时吸光度为0.0035，算出灵敏度0.0007，与规程差的太远。即使假设规程中样品溶液厚度达到1cm，吸光度也才增加1倍。

问题出在哪呢？不知道有哪位测过？麻烦告诉我个大概值，谢谢！
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刘彦刚
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2013/3/28 4:25:20 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
张博：
    你好！
    我也质疑过该指标，我觉得对于给定浓度的特定物质，应该有对应的吸光度，而不是这样大于0.01L/mg。因为我儿子在南京工作，所以我还去请教过理化技术委员会副主任，江苏省院化学所所长蔡冶强。当时他是这样说的，一般化学计量不太用准确度，言下之意：化学量受干拢过多，做到准确很难。他说：对于该检测，从理论上讲，当然是有一正确的吸光值对应。但种种原因，我们的测量只能是尽可能接近该值，而很难达到该值。也就是说：按理该吸光度还应较大于0.05。所以我建议你尽可能做一下该检测，很可能规程给出的该指标是错误的。好象老的规程没该指标。
附件：
JJG 861-1994 酶标分析仪检定规程.pdf
JJG861-2007《酶标分析仪》.pdf
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2013/3/28 4:33:54 Last edit by pxsjlslyg
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2013/3/28 4:35:30 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
他山之石——张博士说：
    从理论和时间表明，规程给出的指标≥0.01/（mg/L）的指标是错的，应该更改为≥0.01Abs
根据【马萱，分光光度计波长误差及灵敏度校核初探，武汉工业大学学报，1992,14】中Cr的eb=0.0055左右（b估计是1cm）
规程中假设液层厚0.5cm，浓度为5mg/L，则A=ebc=0.0055*5/2=0.014
当然，实际液层厚度可能大于0.5cm，但一般不会高于1cm，所以理论吸光度值在0.014-0.028之间
实测某两台酶标灵敏度结果是0.015和0.012左右
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刘彦刚
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2013/3/28 4:36:12 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
张博：
1、你复述的灵敏度要求是≥0.01mg/L，还是≥0.01L/mg？规程给出的可是≥0.01L/mg。
2、你说的实测某两台酶标灵敏度结果是0.015和0.012左右，是0.015和0.012左右L/mg；还是0.015和0.012左右Abs？
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oywtpugoudj
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2013/3/28 4:56:06 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

感谢版主的精心整理
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刘彦刚
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2013/3/28 12:13:44 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
        昨天我向理化计量技术委员会副主任委员请教了该问题，老师的指导给了我启示，使我有了新的思路。后经整理我觉得有点思路：这下让我真正理解了为什么在给定波长，测量给定的重铬酸标液，测得的结果不能用准确度来量度，而只能用灵敏度量度。因为注在酶标板上的被测溶液的液层厚度，不向比色皿那样固定，所以即使仪器是很准确的，也无法测得确定的值。
      而且更可喜的是，因为受到副主任委员的启发。对于张博士提出的问题也得到了解决：因为在酶标板上的被测溶液，也不向比色皿装着那样是固定立方体，从某种意义上讲，它相当于或是凸镜、或许是凹镜的透镜。这样一定会偏离朗伯—比尔定律，或许就使吸光度大了。版友们说有点道理吗？
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2013/3/28 12:14:39 Last edit by pxsjlslyg
刘彦刚
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2013/3/28 15:31:13 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 刘彦刚(pxsjlslyg) 发表:
他山之石——张博士说：
    从理论和时间表明，规程给出的指标≥0.01/（mg/L）的指标是错的，应该更改为≥0.01Abs
根据【马萱，分光光度计波长误差及灵敏度校核初探，武汉工业大学学报，1992,14】中Cr的eb=0.0055左右（b估计是1cm）
规程中假设液层厚0.5cm，浓度为5mg/L，则A=ebc=0.0055*5/2=0.014
当然，实际液层厚度可能大于0.5cm，但一般不会高于1cm，所以理论吸光度值在0.014-0.028之间
实测某两台酶标灵敏度结果是0.015和0.012左右


如果实测值是 实测值是0.015L/mg和0.012L/mg，就说明我们的想法是对的；规程给出的指标和规程宣贯时，给出的检定方法也是对的。
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windy
v2650594
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2019/9/24 10:40:24 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
刘老师，你好，这个灵敏度规程中要求≥0.01，单位是L/mg,而规程中测量法，测量出来的数据是吸光度。这就把握搞蒙了，一个计量性能要求那里给的单位是L/mg与吸光度完全沾不上边哦，不知道咋理解这个项目
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