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液相色谱（LC）

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主题：【求助】急，急，急，液相法测栀子黄含量

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yulin

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发表于：2013/04/11 15:57:59 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有人用液相法做过栀子黄（藏花素主要成分）吗？使用的什么色谱柱？出峰时间是多少？我用C18 4.6*150mm的柱子，流动相为：乙腈+水=5+5，出峰时间为1分多，感觉出峰时间太早了，流动相的比例调过，除了这个比例，其他的出峰效果都不好，峰型不好，峰很宽，除了调流动相外，还有其他的方法能够让出峰时间往后延长些吗？

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2013/4/11 16:47:03 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱条件：
色谱柱ＺＯＲＢＡＸＮＨ２（４．６×１５０ｍｍ）；
柱温：２５℃；
流动相：乙腈：水（８０：２０）；
流速：０．８０ｍｌ／ｍｉｎ；
进样量：１０μl；

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沧海落叶

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2013/4/11 17:16:24 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱温降低。流速变慢

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yulin

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2013/4/11 19:31:06 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
色谱条件：
色谱柱ＺＯＲＢＡＸＮＨ２（４．６×１５０ｍｍ）；
柱温：２５℃；
流动相：乙腈：水（８０：２０）；
流速：０．８０ｍｌ／ｍｉｎ；
进样量：１０μl；

我们没有这个柱子，其他的条件试过了，不适合的

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yulin

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2013/4/11 19:32:59 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 沧海落叶(songdongdong) 发表:
柱温降低。流速变慢

现在的温度已经是25℃了，室温也差不多是这样的，流速明天试试0.8ml/min吧

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remioromen

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2013/4/14 23:47:25 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 yulin(yulin) 发表:
有人用液相法做过栀子黄（藏花素主要成分）吗？使用的什么色谱柱？出峰时间是多少？我用C18 4.6*150mm的柱子，流动相为：乙腈+水=5+5，出峰时间为1分多，感觉出峰时间太早了，流动相的比例调过，除了这个比例，其他的出峰效果都不好，峰型不好，峰很宽，除了调流动相外，还有其他的方法能够让出峰时间往后延长些吗？

响应因子与柱效，流动相比例，温度，固定相，ph等有关。可以各方面考虑，推荐你适当调高大极性溶剂的比例，减弱流动相的洗脱能力。

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nixiaolong

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2013/4/15 8:55:50 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你用的是什么标准样品？栀子苷还是栀子甙

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yulin

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2013/4/15 20:42:21 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 nixiaolong(nixiaolong) 发表:
你用的是什么标准样品？栀子苷还是栀子甙

都不是，是栀子黄素，单标，就是藏花素

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yulin

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2013/4/15 20:43:51 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 remioromen(remioromen) 发表:
原文由 yulin(yulin) 发表:
有人用液相法做过栀子黄（藏花素主要成分）吗？使用的什么色谱柱？出峰时间是多少？我用C18 4.6*150mm的柱子，流动相为：乙腈+水=5+5，出峰时间为1分多，感觉出峰时间太早了，流动相的比例调过，除了这个比例，其他的出峰效果都不好，峰型不好，峰很宽，除了调流动相外，还有其他的方法能够让出峰时间往后延长些吗？

响应因子与柱效，流动相比例，温度，固定相，ph等有关。可以各方面考虑，推荐你适当调高大极性溶剂的比例，减弱流动相的洗脱能力。

明天再试试调流动相的比例看看，不过之前调了，峰型儿不好，明天看看梯度行不行吧

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