主题：【分享】【线下交流会】仪器信息网样品前处理技术交流会●广州站

【线下交流会第六站】仪器信息网样品前处理技术交流会●广州站

活动时间：2013年05月25（周六）
活动地点：广州五山路381华南理工大学逸夫人文馆报告厅（从南门或者南侧门进入较为方便）

主办单位：仪器信息网  华南理工大学分析测试中心  我要测网（woyaoce.cn）

参加人员：由于场地限制，参加现场为本网普通用户（就职于仪器厂商工作的用户暂不能参加本次活动），非常遗憾！

活动参与形式：免费报名参加

报名已满！

目的：样品前处理在分析过程中是一个既耗时又极易引进误差的步骤，样品处理的好坏直接影响分析的最终结果，因此，为了提高分析测定效率，改善和优化分析样品制备方法和技术是一个重要问题。为了促进用户交流，提高用户的仪器技术水平与应用能力，仪器信息网每年都会在全国各地举办线下技术交流活动，邀请当地的资深用户就其使用的仪器及研究领域做相关报告。

主办方：仪器信息网  华南理工大学分析测试中心  我要测网（woyaoce.cn）

交流对象：仪器论坛注册会员

报名方式：网上报名，实体交流，活动无资质，无证书，只为提高自身技能，就近自愿参加的原则。

活动时间：2013年05月25（周六）

活动地点：广州五山路381华南理工大学逸夫人文馆报告厅（从南门或者南侧门进入较为方便）



活动规模：150个名额有限，报名者需是仪器信息网的认证VIP会员。如果您没申请认证，快去申请认证>>>
为将有限的名额留给真正需要的用户，请报名的学员一定要去参加培训，因故不能参加，需至少提前5天通知我们，如未提前说明无故临时不到，将扣除500个积分，同时将禁止参加仪器信息网主办其他的免费活动，所以请大家相互提醒！

活动费用：本次活动免费提供午餐，其他所有费用自理（宿、行），有参与者自行安排。本次活动培训不提供教材，但会提供电子版的课件，参与者可自行打印。

活动内容：
报到时间：2013-05-25上午8:30-9:00

特邀答疑团互动交流

本次活动将邀请多位行业专家、资深用户在现场为参会人员进行面对面的交流与答疑，建议参加者可结合仪器使用情况与工作经历，将您的问题准备好，我们将与您共同探讨解决！

实验室参观



    华南理工大学分析测试中心组建于1982年10月，是学校教学、科研和人才培养的公共支撑平台，服务教学和科研是第一宗旨，促进学科发展和培养创新人才是己任。中心现有专业技术教师和管理人员共27人，其中教授职称3名、副高职称7名、中级职称14名、初级职称3名，博士学位人员8名、硕士学位人员9名，分析测试工作十年以上人员占80%，整体的检测分析能力强。近年来，在学校领导的大力支持下，中心装备了高分辨透射电镜、热场发射扫描电镜、超导核磁共振谱仪、液-质联用仪、多功能化学电子能谱、电子探针、X射线荧光光谱仪、拉曼光谱仪、多功能生物质谱、气-质联用仪、单晶衍射仪等大型精密贵重仪器30台套，仪器总价值5000多万元；拥有独立且相对集中的现代化实验室，使用面积达3000m2；是华南地区规模宏大、设备先进、富具特色、队伍精良的现代分析测试中心之一。

    目前，中心的主要业务范围为：（1）材料的微观形貌和晶体结构研究；（2）微区与表面成分和化学价态分析；（3）痕量、微量和常量元素测定；（4）复杂体系分析、未知物剖析、产品质量评价与失效分析等。在电子显微分析、核磁共振分析、表面界面分析、工业产品失效分析等领域已形成自身特色。还对外承接委托检验、合作科研、新材料新产品研发、有机和无机化学分析、分析实验室建设、检测技术咨询和人员培训等业务，不断加强现代检测技术和分析方法的创新研究工作。作为国家级计量认证合格单位，中心可向社会提供具有法律效力和证明作用的分析测试数据和结果，对外检测项目包括：固体表面及微区分析、多晶材料相组成分析、金属与无机化合物定性定量分析、有机化合物组成及结构分析、有机化合物物性分析等5大类20分项。

活动所有版名参加，且按时到达现场参加活动的用户每人奖励仪器信息网纪念品一件
 
仪器信息网的兄弟姐妹，我们也许熟悉，也许陌生，也许你对论坛这个大家庭还不够了解，也许你从未参加论坛的交流会，也许这里对你来说你只是一个陌生的境地，那你是否愿意融入论坛呢？赶快报名吧>>>>>

各位已报名的朋友们可以将自己工作中遇到困扰较大的问题以回帖方式发出，或者发送内容至zhangt@instrument.com.cn，我们会将您的问题提前发给主讲老师，做充分的准备，以更好的为您解决！

部分提问汇集

1.样品前处理中，有机虑头和注射器是否可以重复使用？
答：有机滤头一般不会重复使用，注射器视情况而定，对未知样品，也一般不会重复使用，尽可能避免样品间的交叉污染。

2.液相数据分析中，对于安捷伦1100、1260或者1290的机器，是否有除工作站以外的软件可以对结果图谱进行优化和分析（方便在私人电脑上进行数据分析）？
答：有的。附加软件：高通量纯化软件分析师软件,LC/MS EASY ACCESS的软件,化学工作站数据浏览器,SPECTRUM MILL MS蛋白质组学数据分析的生物信息软件.

3.对于安捷伦1100或1260检测报告输出结果为PDF或HTML时，如何快速调取保存为PDF/HTML格式的检测报告？（换句话说，如何保存电子档检测报告并快速调取它？）
答：打开离线工作站，报告设置里把文件选项打钩，选择你要的文件格式有PDF,TXT等。然后打开你保存的图谱文件夹就会有一个你选择的文件格式保存的文件。拷下来即使没有安装安捷伦工作站也可以查看。

4.样品前处理净化过程中，何种加压形式既可以保证洗脱液快速流出，又保证净化小柱不被击穿？
答：可通过在固相萃取小柱的上方施加一定压力空气或N2来实现。这样可加快过滤速度，控制柱子活化、淋洗、洗脱全过程的流速，使溶液易于进入固定相孔隙，有利于样液与固定相更紧密接触，从而提高萃取效果。它克服常规的手动固相萃取操作费时、不能确保稳定的流速、不同人员操作结果偏差较大的问题，通过简单的控制消除人为操作的误差，保证在短时间内同时处理几十个样品并具有良好的重现性。

5.氨基甲酸酯类农残用液相检测，有哪些方法可以回避MS或者柱后衍生仪？
　  超临界流体萃取法( SFE) 　是一种利用超临界流体密度高、粘度小、渗透力强等特点,实现被测物从样品中分离的技术。与传统萃取技术相比,超临界流体萃取技术可在低温下提取分离,从而减少和防止热敏成分的氧化和逸散,具有溶剂耗量少、易于自动化、高效快速和环境友好
等优点。
基质固相分散萃取(MSPD)技术　是将样品与适量的固体基质(硅胶、弗罗里硅土、C18、C8等)研磨,使样品吸附在固定基质上,混匀制成半固态作为填料装柱,然后选择合适的有机溶剂洗脱固定相,将各种待测物洗脱下来。其优点为样品提取、净化一步完成,不需要进行组织匀浆、沉淀、离心、pH调节和样品转移等操作步骤。避免了样品均化、转溶、乳化、浓缩等造成的待测物损失,提高了分析速度,使现场检测成为可能。
　固相萃取技术( SPE) 　是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,使之与样品的基质和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。由于SPE具有操作简便快速、有机溶剂用量少、环境污染小等优点,在农药残留分析中得到了广泛的应用。
固相微萃取技术( SPME) 目前SPME萃取待测物可与气相色谱、液相色谱等分析分离技术联用,适用于分析挥发性和难挥发性有机物。由于它是一种无溶剂萃取技术,并具有操作时间短、样品用量少、重复性好、精密度高、检出限低、不会造成二次污染等优点,在农药残留分析中有很好的应用前景。
凝胶渗透色谱技术(GPC) 　其原理是根据溶质(被分离物质)分子量的不同,通过具有分子筛性质的多孔性凝胶固定相,使物质达到分离。凝胶净化技术可以分离相对分子质量从400到107的分子,具有净化容量大、可重复使用、适用范围广、简便、凝胶渗透色谱柱使用寿命长等优点,在农药残留分析中已成为一种重要的分离、净化手段。
酶抑制法　酶抑制法是一种简便、灵敏、经济的快速检测方法。目前乙酰胆碱酯酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测的方法。该法利用有机磷与氨基甲酸酯类农药可特异性地抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性,破坏神经的正常传导,使昆虫中毒致死这一毒理学原理,将AChE与样品反应,根据AChE活性受到抑制的情况,进行样品中的有机磷与氨基甲酸酯类农药残留量分析。其中乙酰胆碱酯酶生物传感器已经成为检测不同介质中的氨基甲酸酯及有机磷类农药的一种常用方法。

6.据报道高效氯氰菊酯有8个手性化合物，是否有方法可以用非手性柱分离/检测这8种手性化合物？
答：可以。HPLC 直接拆分包括手性固定相法（Chiral Stationary Phase，CSP）和手性流动
相（Chiral Mobile Phase, CMP）添加剂法。CSP 法最大优点是手性化合物可以直接分离，不需要非对映异构化。CMP 是将手性选择剂添加到流动相中，外消旋体中各对映体与流动相中的手性选择剂， 组成一对非对映体络合物， 由于非对映体络合物的稳定性以及络合物与固定相的键合能力等性质的差异而实现对映体的分离。CMP 拆分光学对映异构体不需对样品进行衍生化处理，也不需价格昂贵的手性柱，而是将手性选择剂（例如:环糊精、冠醚、酒石酸等）添加
到流动相中，用普通的正相或反相柱（例如:ODS，CN,C8，苯基硅胶等）分离。手性添加剂可流出、可更换，选择范围广，方法简单有效。但不足之处是易引起高柱压和高吸收本底。目前，在拟除虫菊酯类农药手性分离中的应用还很有限。
近年来， 环糊精作为手性选择剂在对映体分离中的研究不断深入，应用领域也不断扩大。杨丽等用手性流动性添加剂反相HPLC 法于C8反相柱上对SR-生物丙稀菊酯进行了分离，并考察了β-环糊精浓度、流动相pH 值、有机改性剂种类等因素对手性拆分的影响， 结果表明： 生物丙稀菊酯对映体在pH 值为6.4，β-环糊精浓度为10.5 mmol/L 时得到最佳分离。

7.安捷伦1100、1260、1290如何设置自动关机（方便晚上通宵检测时节省流动相和减少开机时间）？
答：两种办法：
1.运行方法前，在样品组（就是填写操作人名单和设置数据保存目录的页面）里面勾上宏命令：shut down
2.或者建立一个关机方法，流速和波长什么的随便点，注意用最后清洗的通道管路即可，然后在主界面打开GLP，最后一行命令和宏下面把那个宏命令参数复制粘贴进去，然后打钩。
新版的工作站可以在运行过程中在方法组里面勾上，旧的不可以，必须在运行前打钩。

8.C18反相柱使用完后，一般用何种溶剂进行保柱？有人说用纯乙腈，有人说用纯甲醇，有人说用水：甲醇=10:90，还有人说根据当时检测的流动性保柱子，请问有什么依据或者经验？
答：需要根据使用时的流动相来确定保护方式。如果使用中用到了不挥发的缓冲盐类，尽量不要用纯有机溶剂，否则盐结晶析出造成柱压升高。色谱柱第一次使用，都是用乙腈冲洗，至于洗多少个保留体积，通常是20个。然后再逐步更换到你所用的流动相系统。封存色谱柱时用乙腈的原因是，对柱子的损伤比甲醇小。因为甲醇是质子化试剂，也就是说可以给出质子。也就是说相比于乙腈，甲醇的酸性更强。反向柱因为是把18烷基通过化学反应结合到硅胶上，在酸性环境下不稳定。

9.前处理操作中哪些过程操作不当容易对添加回收率造成较大的影响？（例如行标761-2008的前处理）
答：每一步都会有相应损失，如样品可使用部分的选取、滤纸过滤洗脱、乙腈与水提取分离、去除溶剂过程甚至是膜过滤吸附的影响。样品前处理流程的增加，均会造成目标组分的流失，从而对加标回收率造成影响。

10.液相检测中，有人这样讲：如果峰形拖尾，流动相可适当加酸，如果出峰时间慢/快，可适当加大/减少流动相中乙腈的量，此种说法正确否，有何依据？
答：不准确。如果峰型拖尾的因素有很多，加酸不一定能够改善峰型。出峰时间的改善也需要根据样品在固定相与流动相间的分配比进行。尤其是蛋白或多肽类样品，由于扩散系数较小，加大流速反而更不利于峰型的改善。

1.        HPLC中，加标回收试验中，定量没有问题，回收率有96%，但是保留时间偏差比较大，且没有一个同向的趋势，6针中偏差最大的2针相差了接近3分钟（从峰型与信息量可确定峰），对于一个方法学考察，如果保留时间重现性差，该方法可行嘛？可以怎样去改善？在保留时间重现性上，有没有一个标准规定不能超过一个怎样的范围？

翰海版友解答：保留时间波动一般保持在0.5min范围以内，波动3min就说不过去了；

2.        对于前处理中的萃取，经常存在乳化现象，我们一般采用方法来加快乳化的消除，例如用电吹风加热，但该操作会影响样品成分测定吗？同时想了解一下，萃取一个较标准的操作与消除乳化的方法；
请多多指教！！

翰海版友解答：乳化现象是由于萃取过程中溶剂互溶造成的悬浮液，根据不同的萃取液处理方法有所不同，让见处理有冷冻，加热，超声，调pH等，相对来讲，超声去乳化比较快，不过还是要根据具体萃取过程中用到的有机溶剂来决定。

1、前处理中，如果按照GB_T 20362-2006《 鸡蛋中氯羟吡啶残留量的检测方法 高效液相色谱法》这个标准来做加标回收时，回收率只有45%，请问该实验的前处理有什么该注意的地方？