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主题：【讨论】超生破碎仪能用于细胞器分离吗

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dongdong
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发表于：2007/08/24 11:19:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我想问超声破碎仪能用于细胞器分离吗？有人做过相关实验吗？其中的原理是怎么样的呢，是用不同的能量打碎不同的细胞器吗？还是……？
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2007/8/25 14:40:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
超声破碎的原理：超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它既是一种波动形式,又是一种能量形式。超声对细胞的作用主要有热效应，空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时，摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动，使部分能量转化为局部高热（42－43℃）。空化效应是在超声照射下，生物体内形成空泡，随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡。另外，空化泡破裂时产生瞬时高温（约5000℃）、高压（可达500×104Pa），可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子，由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应，超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化，引起细胞结构损伤。损伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。
从原理上你也可以看到一定的超声强度下，细胞内部结构都会被打破。超声破碎常见的用途是在破碎大肠杆菌里面的包涵体得到过表达的目的蛋白。在超声过程中我们从液体的粘稠度可以发现里面的DNA等都被超声破碎仪给打断，从原来的超微结构变成线性结构（因此液体变得很粘稠），因此在这样的强度和频率下我认为不太适合用于细胞器的分离。细胞器的结构在此条件下会被破坏。
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dongdong
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2007/8/25 15:22:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢，但是也有很多文献都说经过超声破碎以后再来分亚细胞结构的啊，我觉得只要能量选择适中应该是不会破碎亚细胞结构的
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fuyunluori
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2012/12/6 15:45:50 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我想知道，培养的肿瘤细胞在超声破碎仪作用下，细胞内的结构蛋白会被破坏吗？比如说肝癌细胞的碱性磷酸酶活性是否可以测到。我在别人文献中看到可以，但是看你们讨论后，我就有点迷惑了，谢谢了。
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依风1986
xurunjiao5339
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2012/12/6 23:12:19 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个还是可以的，超声波应用还是很广的
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