主题:【讨论】选择流动相的技巧?(参与有奖励哦!)

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Ethon
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原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
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如果有在线过滤器,个人不建议超声脱气,尤其是当流动相中有挥发性缓冲盐的时候,超声会使溶液温度发生变化,会影响pH


挥发性缓冲盐是什么?
例如碳酸氢铵缓冲


液相很少用到挥发性缓冲盐,液质会用到。
我们液相好像多有乙酸铵的
Ethon
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谁知道色谱柱是不是一定要加柱温箱的,加柱温箱有什么好处,还有就是是不是有必要安装保护柱
三人行
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原文由 Ethon(v2741773) 发表:
谁知道色谱柱是不是一定要加柱温箱的,加柱温箱有什么好处,还有就是是不是有必要安装保护柱


如果室内温度恒定可不加柱温箱,如果有特殊要求的还是要加。加柱温箱是确保重现性更好,结果更加准确。
hupilan007
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高质量标准的实验室是没有那么多讲究的:

用抑菌瓶配制的缓冲液可以使用一个月。
Milli-Q出来的水本身就是无菌的。
实验室的温湿度常年保持理想恒定状态不容易生菌。
用超纯水配制的缓冲盐需经0.45的微孔滤膜过滤,不需要超声,超声是最差的脱气方式,好的高效液相都是配有在线脱气装置的,不需要超声脱气。

要想高质量的完成实验,所有的硬件设施都是缺一不可的。
机器要配有sealwash 和needlewash 溶液,每次进样都要开启,shutdown溶液也要配好,实验结束要合理的冲洗系统,这样的常态下基本不会出现什么问题。
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Ethon
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谁知道色谱柱是不是一定要加柱温箱的,加柱温箱有什么好处,还有就是是不是有必要安装保护柱


如果室内温度恒定可不加柱温箱,如果有特殊要求的还是要加。加柱温箱是确保重现性更好,结果更加准确。
那是不是加一个柱温箱柱效更好,寿命也更长一下
三人行
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谁知道色谱柱是不是一定要加柱温箱的,加柱温箱有什么好处,还有就是是不是有必要安装保护柱


如果室内温度恒定可不加柱温箱,如果有特殊要求的还是要加。加柱温箱是确保重现性更好,结果更加准确。
那是不是加一个柱温箱柱效更好,寿命也更长一下


加柱温箱柱效会更好些,寿命长短没有验证过。
gong_ld118
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原文由 Ethon(v2741773) 发表:
谁知道色谱柱是不是一定要加柱温箱的,加柱温箱有什么好处,还有就是是不是有必要安装保护柱


一般做HPLC的实验室,温湿度都有要求,如果能保证环境温度在一定范围内波动,对液相检测的影响可以控制在偏差的范围内。

但是需要注意,反相检测,当流动相中含离子对试剂的时候,因为离子对试剂一般黏度较大,保留时间对温度的变化会比较敏感,建议使用柱温箱。而且不走梯度的话,最好流动相混合一起,用单泵走。以确保RT有较好的重现性。

加柱温箱对柱效没有直接的影响,不过做手性拆分的时候,改变温度对手性异构体的分离效果会有较大影响,是值得考虑的一个优化条件。
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2013/6/12 14:48:47 Last edit by gong_ld118
Ethon
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原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:
技巧好像没有什么特别,只是有时候走梯度的时候把3-4 个通道混合为2个,也许有很好的效果
直接配成混合溶液?
Ethon
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三人行
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原文由 Ethon(v2741773) 发表:
缓冲液还调ph????


不同pH值的缓冲液配制的流动相效果有很大差异。
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