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主题：【讨论】白蛋白用顶空可以测残留吗

浏览0 回复13 电梯直达
linda_cpu
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发表于：2013/05/31 09:54:08 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
        最近在做用气相测白蛋白中有机溶剂的残留量.样品只在水中溶解,所以选择的溶剂为水,溶解后为白色胶体状.

      采用80度平衡加热20分钟顶空进样.可是进样后发现白蛋白变性了,变成了固体.虽然有机溶剂有检出,但是很担心,溶剂会不会在蛋白变性的过程中封存在样品内啊,此方法可行吗.
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2013/5/31 13:45:14 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也许50至60度就足够了（温度越高，出去的水也越多），我测自来水中的VOC用55度，加热30分钟。
  关键是看你的有机溶剂是啥，只要其沸点在200度以下就行，否则顶空效果不是太理想。
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2013/5/31 13:53:03 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果你的溶剂沸点很低，比如只有60度或以下，那顶空加热40度恐怕也行，你担心“溶剂会不会在蛋白变性的过程中封存在样品内”，这个值得考虑。你可以在加热温度、加热时间、检测灵敏度以及白蛋白是否凝固几方面找到平衡点。

  希望得到您的反馈，谢谢！
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linda_cpu
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2013/5/31 14:36:22 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xdzh130(xdzh130) 发表:
如果你的溶剂沸点很低，比如只有60度或以下，那顶空加热40度恐怕也行，你担心“溶剂会不会在蛋白变性的过程中封存在样品内”，这个值得考虑。你可以在加热温度、加热时间、检测灵敏度以及白蛋白是否凝固几方面找到平衡点。

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我测得溶剂是乙醇和三氯甲烷,顶空四十度太低了吧.
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安平
byron1111
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2013/5/31 19:44:41 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
40度问题不大。


    但是定量方法需要注意，基质的影响比较大。
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xiaowang268
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2013/6/1 10:02:02 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
白蛋白变成了固体或多或少会有影响吧
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xiaowang268
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2013/6/1 10:02:41 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不过可以预先把蛋白沉淀掉啊
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qqqid
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2013/6/1 17:37:46 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 linda_cpu(linda_cpu) 发表:
原文由 xdzh130(xdzh130) 发表:
如果你的溶剂沸点很低，比如只有60度或以下，那顶空加热40度恐怕也行，你担心“溶剂会不会在蛋白变性的过程中封存在样品内”，这个值得考虑。你可以在加热温度、加热时间、检测灵敏度以及白蛋白是否凝固几方面找到平衡点。

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我测得溶剂是乙醇和三氯甲烷,顶空四十度太低了吧.


国标方法GB/T 5750 里面做饮用水中三氯甲烷、四氯化碳，顶空平衡温度就是40度。
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安平
byron1111
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2013/6/2 22:25:31 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品溶液如果在40度下比较均一，应该是可以选择的。
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秋醉虞阳
wangjianhua1102
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2013/6/2 22:39:45 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最好不要让蛋白变性，干扰检测因子。你可以做过回收率后在下结论
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雨木霖
mickeylin
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2013/6/2 22:40:18 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
蛋白质一般是42度以上就会慢慢的变性凝固。
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