主题:【求助】三七含量液相的问题

浏览0 回复12 电梯直达
小panppan
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大家好,我是新来的小朋友,有个问题想请教大家。

      今天做的三七的含量,对照品和供试品完全按照2010版药典配制,没有难度。虽然梯度洗脱是第二次经历,但是仪器设置和操作应该没有问题,第一针是对照品,还不错,三个峰依次跑出,分别是14、20、49分钟出来,第二针打了对照品,发现竟然只在47分钟出了一个小包,然后我们又进了一针供试品,同样的情况又出现了,我们接着打了对照品,可是奇怪的是这针对照品竟然和供试品一样只出了一个峰,在47分钟左右,又进了一针对照品仍然如此,我们很疑惑怎么会出现这种情况,大家能帮忙分析下吗?

        另一个问题是,按照药典要求做对照品依次出来的三个峰分别是什么峰呢?请大家告诉我,谢谢了!
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有水有渝
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楼主能传个图上来吗,是否梯度没有完全回复又进了第二针,另外后面进的是说只有47分钟有峰,前面都没有峰出来,47分钟的峰是变大了还是变小了?进样前后压力有没有变化
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2013/7/30 19:45:28 Last edit by xky0230699
cminzhen
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如图,应该是差不多的 第一个16分钟左右的R1,21分钟左右的是Rg1,47分钟左右的是Rb1,至于您没有出峰,是不是系统问题,做这个样品需要梯度洗脱,您换台仪器看看试试
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小panppan
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:

楼主能传个图上来吗,是否梯度没有完全回复又进了第二针,另外后面进的是说只有47分钟有峰,前面都没有峰出来,47分钟的峰是变大了还是变小了?进样前后压力有没有变化


谢谢回复!每一针都走了65分钟,基线有点向上飘,回不来了,但是压力和起始差不多了。对于样品的峰和对照品不一样,我可以理解,因为取得是三七的某一部分,并不是三七药材。但是我们纠结的是后来打得对照品为什么也只有一个峰了。还有就是能否提供一下三个峰的出峰顺序,人参皂苷Rb1,人参皂苷Rg1,三七皂苷,再次感谢!
小panppan
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原文由 cminzhen(cminzhen) 发表:


如图,应该是差不多的 第一个16分钟左右的R1,21分钟左右的是Rg1,47分钟左右的是Rb1,至于您没有出峰,是不是系统问题,做这个样品需要梯度洗脱,您换台仪器看看试试


非常感谢!看来第一针的对照品出峰应该是差不了的。我们是梯度洗脱的。
有水有渝
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后面进的47分钟出峰的峰高、峰形等与第一针比有什么变化?
chl19710707
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原文由 小panppan(v2732277) 发表:
大家好,我是新来的小朋友,有个问题想请教大家。

      今天做的三七的含量,对照品和供试品完全按照2010版药典配制,没有难度。虽然梯度洗脱是第二次经历,但是仪器设置和操作应该没有问题,第一针是对照品,还不错,三个峰依次跑出,分别是14、20、49分钟出来,第二针打了对照品,发现竟然只在47分钟出了一个小包,然后我们又进了一针供试品,同样的情况又出现了,我们接着打了对照品,可是奇怪的是这针对照品竟然和供试品一样只出了一个峰,在47分钟左右,又进了一针对照品仍然如此,我们很疑惑怎么会出现这种情况,大家能帮忙分析下吗?

        另一个问题是,按照药典要求做对照品依次出来的三个峰分别是什么峰呢?请大家告诉我,谢谢了!


楼主的问题解决了吗,是不是梯度洗脱的时间程序设置的有问题,我一般回到初始浓度后再平衡10分钟左右才进下一针。楼主可以试试不进样,开启梯度洗脱程序先走走。
chl19710707
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还有楼主如果想知道这三个峰分别是什么,最好自己分别配置三个对照,进针看看就知道了,可以不用配制的很准确的
小panppan
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原文由 chl19710707(chl19710707) 发表:
原文由 小panppan(v2732277) 发表:
大家好,我是新来的小朋友,有个问题想请教大家。

      今天做的三七的含量,对照品和供试品完全按照2010版药典配制,没有难度。虽然梯度洗脱是第二次经历,但是仪器设置和操作应该没有问题,第一针是对照品,还不错,三个峰依次跑出,分别是14、20、49分钟出来,第二针打了对照品,发现竟然只在47分钟出了一个小包,然后我们又进了一针供试品,同样的情况又出现了,我们接着打了对照品,可是奇怪的是这针对照品竟然和供试品一样只出了一个峰,在47分钟左右,又进了一针对照品仍然如此,我们很疑惑怎么会出现这种情况,大家能帮忙分析下吗?

        另一个问题是,按照药典要求做对照品依次出来的三个峰分别是什么峰呢?请大家告诉我,谢谢了!


楼主的问题解决了吗,是不是梯度洗脱的时间程序设置的有问题,我一般回到初始浓度后再平衡10分钟左右才进下一针。楼主可以试试不进样,开启梯度洗脱程序先走走。


是的,我一般多走十分钟才结束采集,应该是平衡好了。
武灵
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楼主连续走几次对照品看看图谱变化如何?进供试样后进对照品,对照品的峰也变成47min时的一个了?出问题前后,流动相没变过吧?就如楼上有水有渝老师所说,后面进针,47min的峰如何变化的?
jauny0000
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你在走梯度的时候  进第二针开始  有没有重新平衡压力  有时一针结束了要平衡好久才可以进第二针的  要不然就变成梯度混乱了
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