主题:【求助】基线漂移---两种流动相不在同一条基线上?

浏览0 回复14 电梯直达
小桃园2012
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之前发过帖子求助

液相出峰后不回到基线上而是下移一些再走直线?经过一系列排查(冲系统、换柱子、换试剂等)

现在的情况是这样的:在不联接柱子、不进样品的情况下走梯度洗脱程序,出现了如图的情形。求解!第一幅图为由流动相A---B---A的过程。第二幅图为由流动相B---A---B的过程。这两种流动相走不到同一条基线上。

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doczheng
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有水有渝
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不知道楼主的流动相组成,检测波长与梯度过程,如果是梯度,基线有移动很正常,应该是A组分中的背景吸收大于B。流动相组成不同、梯度过程不同,基线怎么可能重合?
e_liang369
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正常现象,走梯度的话对流动相的要求比较高,尽量选择一些好的品牌
小桃园2012
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:

不知道楼主的流动相组成,检测波长与梯度过程,如果是梯度,基线有移动很正常,应该是A组分中的背景吸收大于B。流动相组成不同、梯度过程不同,基线怎么可能重合?


流动相是A--0.05mol/l磷酸盐缓冲液PH=6.5和B--0.05mol/l甘氨酸盐酸缓冲液PH=2.5(B相液也就是洗脱液)

波长280  梯度过程:时间      流速(ml/min)      A(%)            B  (%)

                                    0            0.4                          100                0

                                    4.5          0.4                          100                0

                                    5.5          0.4                            0                  100

                                    15            0.4                            0                  100

                                  15.5        0.4                          100                  0

                                  22.0            0.4                        100                0
小桃园2012
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原文由 小桃园2012(v2851678) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:

不知道楼主的流动相组成,检测波长与梯度过程,如果是梯度,基线有移动很正常,应该是A组分中的背景吸收大于B。流动相组成不同、梯度过程不同,基线怎么可能重合?


流动相是A--0.05mol/l磷酸盐缓冲液PH=6.5和B--0.05mol/l甘氨酸盐酸缓冲液PH=2.5(B相液也就是洗脱液)

波长280  梯度过程:

时间      流速(ml/min)      A(%)            B  (%)

  0            0.4                          100                0

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小桃园2012
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原文由 小桃园2012(v2851678) 发表:
原文由 小桃园2012(v2851678) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:

不知道楼主的流动相组成,检测波长与梯度过程,如果是梯度,基线有移动很正常,应该是A组分中的背景吸收大于B。流动相组成不同、梯度过程不同,基线怎么可能重合?


流动相是A--0.05mol/l磷酸盐缓冲液PH=6.5和B--0.05mol/l甘氨酸盐酸缓冲液PH=2.5(B相液也就是洗脱液)

波长280  梯度过程:

时间      流速(ml/min)      A(%)            B  (%)

  0            0.4                          100                0

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zhoujin83
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这梯度变化太快,基线不这样才怪。为了使基线变得平滑,需要将梯度调缓。
小桃园2012
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原文由 zhoujin83(zhoujin83) 发表:

这梯度变化太快,基线不这样才怪。为了使基线变得平滑,需要将梯度调缓。


这个方法做了好多年了,之前从未发生过这样的问题,应该不是梯度的问题。总是怀疑系统或设备的什么地方出问题了。
小桃园2012
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原文由 zhoujin83(zhoujin83) 发表:

这梯度变化太快,基线不这样才怪。为了使基线变得平滑,需要将梯度调缓。


这个方法做了好多年了,之前从未发生过这样的问题,应该不是梯度的问题。总是怀疑系统或设备的什么地方出问题了。
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