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主题：【求助】请教使用离子对流动相多的高手有关问题

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发表于：2014/03/14 21:38:33 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近在做离子对试剂的流动相来检测多肽，从开始做到现在，保留时间一直都不是很稳定，流动相用的是甲烷磺酸钠和乙腈，加高氯酸，用氢氧化钠来调PH，酸性ph。保留时间有时候是20min,有时候是22min，有时候是21min，还有27min,和25min的。不知道各位使用离子对试剂多的高手有没碰到类似的问题，导致保留时间漂移的原因一直都没找到。我在想是室温的原因吗，但是不像，同一天不同的仪器就算是一起配的流动相分两份使用保留时间就不一样，用两根同型号的柱子。难道是平衡时间不够吗，但是就算平衡半天时间，平衡之前和平衡之后的保留时间还是一样的（比如平衡前时间是25min,平衡后还是25min）。请教各位高手，帮忙分析下原因，或者你们碰到类似的问题是怎么解决的
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2014/3/14 22:01:52 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
保留时间越长，流动相、室温等有关因素有些微小差别，保留时间相差越大。
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liufeilzu
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2014/3/15 10:08:26 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
离子对试剂方法不做梯度方法，还是很稳定的，注意保持柱温稳定
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2014/3/16 9:29:38 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
仪器室用的安捷伦1200和1260，流动相预热的，柱温应该是比较稳定的
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zhoujin83
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2014/3/16 17:07:50 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果是普通的小分子化合物，那么可能是流动相的pH不合适。但是多肽我没接触过，不知道。
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2014/3/19 8:48:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主这个是标准方法吗？离子对浓度是否正确，另外仪器是否正常稳定。
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小虾米
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2014/3/26 16:47:42 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
离子对试剂虽然说是不稳定，但也没有你这种离谱，应该找下原因！
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