主题:【第七届原创】浅谈反相液相色谱分析条件的优化与选择(一)

浏览0 回复27 电梯直达
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happy王子矜
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1第一条前半句问题不大,后半句不能说不对,有些情况下也是可以出现的,但是一般填料种类接近,性能靠谱的色谱柱间,峰高和峰面积差别不大。除非峰型已经基本不能看,否则不太会有通过更换色谱柱来改变灵敏度的情况。

2波长与分离度的关系描述并不正确,楼主的图也不能反应啥问题。只能说峰响应越大,可能造成的峰重合越多,体现出来就是分离度数据不好。

这里错误有两点,第一,不一定波长越低,吸收越好,只能说很多化合物(苯环类在260~190之间的比较多,但是也有个吸收的山峰谷底)在某些波段会这样,如果是硝基苯之类的,可能260以上某些波长的吸收比低波长更好,楼主说的这个现象就反过来了

第二,波长应该是在流动相体系之前确定的事情,所以说,通过改变波长来修正某方法里面的分离度什么的,是非常不靠谱的行为。楼主的观点即使正确,也没啥实际用处.

3一般情况下是这样,不过有例外情况。增加流动相极性不一定会起到加大分离度。增加流动相极性,一般来说会增加所有峰的保留时间,但是每个峰增加的程度不一定一样,所以说,两个峰越走越近也是有可能的。

4流速对分离度的增加减小影响不大,其他情况下搞不定的时候会试试看,不过也是个微调的作用。至于灵敏度,不应该在关心范围之内。。。

以上都是针对反相C18类色谱柱和紫外或DAD类检测器,其他条件下会有另外的变化,一句两句就说不清了,也没有什么普遍规律。

个人观点,有不对的欢迎交流,不过我可能回复比较慢最近比较忙,见谅。
一片枫叶
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原文由 happy王子矜(wangzijin) 发表:
1第一条前半句问题不大,后半句不能说不对,有些情况下也是可以出现的,但是一般填料种类接近,性能靠谱的色谱柱间,峰高和峰面积差别不大。除非峰型已经基本不能看,否则不太会有通过更换色谱柱来改变灵敏度的情况。

2波长与分离度的关系描述并不正确,楼主的图也不能反应啥问题。只能说峰响应越大,可能造成的峰重合越多,体现出来就是分离度数据不好。

这里错误有两点,第一,不一定波长越低,吸收越好,只能说很多化合物(苯环类在260~190之间的比较多,但是也有个吸收的山峰谷底)在某些波段会这样,如果是硝基苯之类的,可能260以上某些波长的吸收比低波长更好,楼主说的这个现象就反过来了

第二,波长应该是在流动相体系之前确定的事情,所以说,通过改变波长来修正某方法里面的分离度什么的,是非常不靠谱的行为。楼主的观点即使正确,也没啥实际用处.

3一般情况下是这样,不过有例外情况。增加流动相极性不一定会起到加大分离度。增加流动相极性,一般来说会增加所有峰的保留时间,但是每个峰增加的程度不一定一样,所以说,两个峰越走越近也是有可能的。

4流速对分离度的增加减小影响不大,其他情况下搞不定的时候会试试看,不过也是个微调的作用。至于灵敏度,不应该在关心范围之内。。。

以上都是针对反相C18类色谱柱和紫外或DAD类检测器,其他条件下会有另外的变化,一句两句就说不清了,也没有什么普遍规律。

个人观点,有不对的欢迎交流,不过我可能回复比较慢最近比较忙,见谅。


感谢老师指教!
花心17
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karenia
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感谢分享,期待各位老师的更新!真理越辩越明!!!
houjjun
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zj2635
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原理性的内容描述太多,能结合一些实例进行说明就更好了。
liu461116185
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