主题:【求助】液相图谱有个一直出现的未知峰,求助

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pukairen
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最近在开发液相方法,参照的USP检测方法,流动相是Buffer:乙腈:甲醇,Buffer是己烷磺酸钠、无水硫酸钠和0.5mol/L的硫酸,波长是222nm。结果在3~4分钟一直会出现一个峰,不论是样品还是空白对照都有,也试过进样纯水、甲醇、乙腈,都还是会出现这个峰,换了仪器(安捷伦,waters,岛津)和色谱柱也一样会有。减少进样量,峰面积也会随之减少。有没有老师知道这个峰可能是什么,怎么消除掉啊?
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不知道你Buffer的pH是多少。有0.5mol/L的硫酸,估计不会很高。
另外,是等度还是梯度?一般等度很少会出现这种情况。
从你的描述来分析,应该是梯度变换引起的。
建议你不进样,直接走一下方法试一下。如果还有,基本可以确定是梯度变换过快引起的基线波动了。
pukairen
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原文由 逆天一棍(fengmo4668) 发表:
不知道你Buffer的pH是多少。有0.5mol/L的硫酸,估计不会很高。
另外,是等度还是梯度?一般等度很少会出现这种情况。
从你的描述来分析,应该是梯度变换引起的。
建议你不进样,直接走一下方法试一下。如果还有,基本可以确定是梯度变换过快引起的基线波动了。

跑的是等度啊,不是梯度,buffer 1300ml 里有0.4g的己烷磺酸钠,2g的无水硫酸钠和6ml的0.5mol/L硫酸。流动相Buffer:ACN:MeOH=65:20:15
三人行
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wajer
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原文由 pukairen(v2924720) 发表:
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不知道你Buffer的pH是多少。有0.5mol/L的硫酸,估计不会很高。
另外,是等度还是梯度?一般等度很少会出现这种情况。
从你的描述来分析,应该是梯度变换引起的。
建议你不进样,直接走一下方法试一下。如果还有,基本可以确定是梯度变换过快引起的基线波动了。

跑的是等度啊,不是梯度,buffer 1300ml 里有0.4g的己烷磺酸钠,2g的无水硫酸钠和6ml的0.5mol/L硫酸。流动相Buffer:ACN:MeOH=65:20:15
有己烷磺酸钠这个离子对试剂的流动相,平衡会慢一些,但针针出来一个固定的峰,貌似是被污染了。
建议你去两方面入手,一是确认不是配样过程中带进来的杂质;二是确认进样针污染的可能性。
pukairen
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原文由 wajer(anwiner) 发表:
不进样还会有3分钟的鬼峰?

不进样的话就没有了,但是只要进样,不论进的是什么(空白溶剂,流动相,纯水,乙腈,甲醇)都会有这个峰
pukairen
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原文由 逆天一棍(fengmo4668) 发表:
原文由 pukairen(v2924720) 发表:
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不知道你Buffer的pH是多少。有0.5mol/L的硫酸,估计不会很高。
另外,是等度还是梯度?一般等度很少会出现这种情况。
从你的描述来分析,应该是梯度变换引起的。
建议你不进样,直接走一下方法试一下。如果还有,基本可以确定是梯度变换过快引起的基线波动了。

跑的是等度啊,不是梯度,buffer 1300ml 里有0.4g的己烷磺酸钠,2g的无水硫酸钠和6ml的0.5mol/L硫酸。流动相Buffer:ACN:MeOH=65:20:15
有己烷磺酸钠这个离子对试剂的流动相,平衡会慢一些,但针针出来一个固定的峰,貌似是被污染了。
建议你去两方面入手,一是确认不是配样过程中带进来的杂质;二是确认进样针污染的可能性。

因为进样纯水,甲醇,乙腈都会有这个峰,应该排除掉配样过程引入污染的可能了。
期间换过好几台液相,都出现过这个问题,应该也不是仪器进样针污染
夏天的雪
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不知道你Buffer的pH是多少。有0.5mol/L的硫酸,估计不会很高。
另外,是等度还是梯度?一般等度很少会出现这种情况。
从你的描述来分析,应该是梯度变换引起的。
建议你不进样,直接走一下方法试一下。如果还有,基本可以确定是梯度变换过快引起的基线波动了。

跑的是等度啊,不是梯度,buffer 1300ml 里有0.4g的己烷磺酸钠,2g的无水硫酸钠和6ml的0.5mol/L硫酸。流动相Buffer:ACN:MeOH=65:20:15
有己烷磺酸钠这个离子对试剂的流动相,平衡会慢一些,但针针出来一个固定的峰,貌似是被污染了。
建议你去两方面入手,一是确认不是配样过程中带进来的杂质;二是确认进样针污染的可能性。

因为进样纯水,甲醇,乙腈都会有这个峰,应该排除掉配样过程引入污染的可能了。
期间换过好几台液相,都出现过这个问题,应该也不是仪器进样针污染
不进样,直接走方法会出现这个峰吗?
pukairen
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原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
可能是流动相的问题,流动相中有杂质污染

期间配制流动相换过不同批号的甲醇、乙腈,Buffer里也换过不同批号的己烷磺酸钠,就只剩硫酸和无水硫酸钠没有换过了,硫酸是南京化药的,无水硫酸钠是国药的,都是分析纯的
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