抗生素头孢喹肟的动物体内药动学分析

头孢喹肟是目前唯一一个动物专用第四代头孢类抗生素，具有抗菌谱广，抗菌活性强的特点，适用于非肠道用药；源于基本头孢菌素结构的化学修饰提供了头孢喹肟的两性离子性质。头孢喹肟的这一特性可以促进其迅速跨生物膜渗透作用（包括细菌细胞壁的孔蛋白），从而增强生物利用度，较第二代和第三代头孢菌素抗菌谱更广。它对临床重要细菌的染色体和质粒编码的β-内酰胺酶高度稳定。被用于治疗动物呼吸道的疾病，牛的急性乳腺炎和腐蹄病，小牛败血症，猪子宫炎，乳房炎，无乳综合征，马驹败血病，其也是治疗羊的各类疾病的药物。

材料和方法: 头孢喹肟,、色谱乙腈、色谱甲醇、三氟乙酸（TFA）、去离子水。

岛津高效液相色谱仪、SPD-10AVP UV-VIS检测器268纳米处进行检测、柱温箱40°C、Phenomenex Gemini C18色谱柱 (250 mm ×4.6 mm; 5u m)。

流动相为乙腈和0.1％三氟乙酸水溶液，以0.9 ml/min的流速进行洗脱。

标准溶液配制：

头孢喹肟的储备溶液通过直接称量干燥后的标准物质溶解于水中，浓度1mg/ ml，并将该溶液保存于-70℃。头孢喹肟标准溶液通过加入空白血浆配制成溶度为0, 0.02, 0.04, 0.10, 0.40, 1, 2, 4, 10,和 12 ug/ml的溶液。

样品制备：200ul血浆中加入1.5毫升微量离心管中，加入等体积的甲醇使蛋白质沉淀，离心（4000转/min）10分钟后，300ul的上清离心液移入新鲜小瓶中，加入150ul去离子水混合，再吸取50ul上清液进样分析。

液相方法的验证：

选择性-选择性通过分析空白血浆、加入头孢喹肟的血浆、从羊服用头孢喹肟药代动力学研究中获得的血浆样品进行评价，无内源性化合物对目标化合物的干扰。

线性标准曲线-本方法的线性通过在0.02-12ug/ml的范围内的校正曲线评价。

灵敏度-通过进样 0.01ug/ml-0.1 ug/ml评价其信噪比。

精密度和准确度-头孢喹肟样品分低中高浓度分别进样分析，每个浓度分别进样六次日间、日内测定。

回收率-为了计算头孢喹肟的绝对回收率分别加入 0.4ug/ml, 2ug/ml, 和10ug/ml浓度样品，每个浓度分别重复6次进行加入和提取。

稳定性-标准储备液的稳定性在两个条件下进行考察，室温保存24小时及-70°C保存90天，稳定性通过比较考察后样品的峰面积与新鲜制备的溶液的峰面积的比值。对于每个储存条件进行5个平行样品。

结果与讨论：

头孢喹肟HPLC分析流动相梯度条件:

5、本实验采用高效液相色谱（HPLC）法，配紫外 - 可见光检测头孢喹肟在绵羊血浆中浓度进行定量分析，方法灵敏、简便。色谱柱采用Phenomenex Gemini C18column (250 mm ×4.6 mm; 5u m)。流动相为乙腈和0.1％三氟乙酸水溶液，以0.9 ml/min的流速进行洗脱。

6、样品制备为向200ul血浆中加入等体积的甲醇使蛋白质沉淀，离心后吸取50ul上清液进样分析。标准曲线线性范围为0.02-12ug/ml。日内和日间变化系数均小于5％。样品冰冻保存稳定。

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主题：【第七届原创】抗生素头孢喹肟的动物体内药动学分析