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主题：【已应助】请大神判断以下情况的原因及如何避免

浏览0 回复6 电梯直达
gy_y_xj
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发表于：2015/04/13 18:13:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做了酒石酸，苹果酸，乳酸，柠檬酸，裸管，磷酸盐和硼酸盐各5mM，电压20，温度25，分离的图里面后两个成分峰型很糟糕，加了5mM邻苯二甲酸氢甲后灵敏度大幅提高，可是所有峰都很糟糕，请大神帮忙看一下怎么搞，前面一张图是未加邻苯二甲酸氢钾的图的后半部分，前半部分峰非常完美；后面的图是加过邻苯二甲酸氢钾的

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gy_y_xj
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2015/4/13 20:24:52 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
手机编辑的，图没传上去忘发了
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xsh6743
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2015/4/14 9:19:51 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
等你的图看看
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2015/4/14 9:44:50 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由xsh6743发表： 等你的图看看
大神，图来了
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nini2006
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2015/4/14 11:04:24 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
之前图片 显示不出来，现在帮你搞好了。

你这是间接检测法吗？如果是，那么第二个图你应该把它倒过来，这样才好前后进行比较。

峰型不好一般是因为样品溶剂跟buffer差异太大，你可以用buffer来溶解样品再试试
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2015/4/16 10:19:58 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在你的buffer中，盐浓度太低，适当提升盐浓度可以有效压缩电泳的峰形。你可以尝试一下。另外，个人觉得没必要采用磷酸盐与硼酸盐的混合体系，只采用其中一种就好。做这种有机酸的分离，有商品化的试剂盒，分离十几种都可以分得很好。
我看你用的Agilent的机器，Agilent就有专门的organic acid kit.
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gy_y_xj
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2015/4/16 10:52:11 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由v2812644发表： 在你的buffer中，盐浓度太低，适当提升盐浓度可以有效压缩电泳的峰形。你可以尝试一下。另外，个人觉得没必要采用磷酸盐与硼酸盐的混合体系，只采用其中一种就好。做这种有机酸的分离，有商品化的试剂盒，分离十几种都可以分得很好。
我看你用的Agilent的机器，Agilent就有专门的organic acid kit.
好嘞，试一试，但浓度高了出峰是不是会很慢呀？
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