主题：【第八届原创】方法及单向阀原理思考

实验的目的是测试样品中未知的一类高分子的含量，方法现成的，按部就班测试就可以了，为了让自己成为一只有进化潜力的实验猿，在此分享一下实验经历和过程中的种种疑问，还望有类似经历的大虾版友们给予指导，不慎感激~~
仪器型号：waters 2695-2998
试剂：甲醇 乙腈 25mM磷酸二氢钠 高分子标准品 未使用过的药液 ( 空白及稀释用 )
样品：含不同浓度高分子的药液 （浓度与颜色成正比，测试结果可以参考用）
流动相：甲醇、乙腈、25mM磷酸二氢钠  梯度测试，具体如下图所示（上图最简单）  其他参数不在此赘述。

实验过程还是非常简单的，没有前处理，全部直接进样，大致流程如下：
1、用未使用的药液配置标准溶液：0.1%；1.0%；2.0%；5.0%
2、待仪器平衡好以后，依次测试 Blank  STD1 STD2 STD3 STD4  Sample 1、2、3....
最重要部分，数据处理（被告知如下操作）
1、处理空白  手动积分2-24min，扣除大约10min处的溶剂峰（被告知这个高的峰就是溶剂峰）得到前后两个峰，记录对应的峰面积，如下图

2、处理标准品  处理方法与空白一样

处理完空白和标准品以后，我自己比较了一下谱图，貌似线性可以使用

这里把流速也合在谱图上，供版友分析

3、同理处理样品谱图，记录相应的峰面积
4、Excel处理刚才记录的峰面积，绘制标准曲线，计算样品结果，如下图

如上流程测试出样品中高分子的含量。
上述流程的计算原理可以理解，我的疑问是
1、如何判断在Blank谱图中最高的那个峰是溶剂峰，计算过程中需要扣除，为什么在手动积分的时候没有将前后部分的也扣除掉？
2、即使是溶剂峰，但是在 STD 和样品中也有溶剂峰，如果不扣除，全部都带入计算会有哪些影响？
3、再一个就是为什么用这样的流动相，走这样的梯度。
如标题所示，在实验进行过程中出现的另外一些关于单向阀的问题，在这里也想和大家分享一下。作者小白一个，刚接触液相......
上述实验中有使用到乙腈。我们家的仪器有两种单向阀：红宝石和陶瓷的。一直不知道有这个区别，当时工程师给装的啥，咱就用啥。直到做了这个实验，仪器平衡好以后，按上述流程测试，往往一个样品还没有走完，仪器就报错说“lost prime”，没有流速，没有压力。当时各种抓瞎，工程师到最后才提到原因可能是我们家的单向阀是红宝石的，不耐乙腈，让我看看备件里面有没有带C的单向阀（陶瓷的），换上陶瓷的试试，换上以后好了，测试了几次还都正常。
还有就是前段时间换回红宝石的单向阀，走等度测试，压力出现倒刺一样的波动。

就这个问题我在仪器信息网上也发帖咨询过，版友们给了很多的意见和建议，最终的原因是因为有气泡残留在单向阀中，虽然之前在网上看到过，那次自己碰到然后各种抓挠的解决了问题，好一阵兴奋。
最近这样的问题又出现了，然后各种wet prime、超声清洗单向阀，问题貌似只改善了一丢丢（这里弱弱的问一下wet prime的最大流速是不是7.5ml/min）。实在没法子了，实验又非常紧急，各个方面都在催数据，只有死马当活马医了。不管了直接上机跑样，最终压力的监视图如下。

压力还算稳定，虽然有倒刺，貌似定量什么的结果好像在范围内，就这样糊弄过去了。可是内心不安呐。
絮叨了这么些，关于单向阀主要有两个问题：
1、这个单向阀对溶剂的是有选择性的？例如红宝石的对乙腈不太感冒，机理是什么？
2、单向阀清洗，感觉上能用的方法也都试过了，但是装上去一监视，压力还有有倒刺，也不能说完全没有改善，难道还是么有洗彻底？
版友里有没有遇到过上述罗里吧嗦的一些问题，你们的解决方法能教教我么，还有哪位大神可以告诉我这些更高一层的原理呀