对照品溶液的制备 取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖60mg,精密称定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含无水葡萄糖0.6mg)。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml,分别置50ml量瓶中,各加水至刻度,摇匀。分别精密量取上述溶液2ml,置具塞试管中,各精密加4%苯酚溶液1ml,混匀,迅速精密加入硫酸7ml,摇匀,置40℃水浴中保温30分钟,取出,置冰水浴中放置5分钟,取出,以相应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅴ A)在490nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
测定法 取金樱子肉粗粉约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加水50ml,称定重量,静置1小时,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液1ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取25ml,置50ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取2ml,置具塞试管中,照标准曲线的制备项下的方法,自“各精密加4%苯酚溶液1ml"起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中金樱子多糖的重量(μg),计算,即得。
对照品浓度 | 0.6 | mg/ml | |||
标准曲线 | |||||
取样量(ml) | 0.5 | 1 | 1.5 | 2 | 2.5 |
浓度C(mg/ml) | 0.012 | 0.024 | 0.036 | 0.048 | 0.06 |
吸光度A | 0.095 | 0.198 | 0.322 | 0.438 | 0.562 |
对照品浓度 | 0.6 | mg/ml | |||
标准曲线 | |||||
取样量(ml) | 0.5 | 1 | 1.5 | 2 | 2.5 |
浓度C(mg/ml) | 0.006 | 0.012 | 0.018 | 0.024 | 0.03 |
吸光度A | 0.095 | 0.198 | 0.322 | 0.438 | 0.562 |
原文由 王小露(v3032772) 发表:3.我个人觉得是可以的
依我个人的观点是这样的,不知道这样理解是否对不对?还望大家当指点一下:
1.不管怎么计算,可以肯定的是不管标曲各点的浓度和供试品溶液的浓度物质的量是不便的。
2.从配置的操作步骤来看,后面几步操作步骤不管是是从添加试剂量还是处理的条件来看都是一模一样的,那么我们能否不管后面这些操作相同不做所稀释的对应出来的浓度,而是直接把浓度转换成每个标曲对应点的物质的量,因为再怎么稀释,最终结果物质的量是不会变的,毕竟体积相同,浓度和对应的吸光度成梯度线性关系,那么他对应的物质的量和对应的吸光度也应该成梯度线性关系。毕竟一个容易的吸光度是唯一的。
3.根据线性关系,供试品的计算处理过程中能否按照吸光度和物质的量来处理计算呢?
我不知道这样的理解是否对不对,还希望各位同仁帮指点一下。