主题：【第八届原创】某降压药的手性分离—我的拖尾，我做主

某降压药的手性分离—我的拖尾，我做主

1.前言
近年来，由于受到遗传、环境、生活水平等诸多因素的影响，高血压的发病率日趋升高，成为中老年人群的常见疾病。这种现象也就催生了大量降压药的问世，盐酸马尼地平就是其中一种。

盐酸马尼地平是新型的二氢吡啶(DHP)类钙拮抗剂，存在1个光学活性中心，临床上以消旋体的形式存在，且两种对映体生理活性差异较大，S型是R型生理活性的30-80倍。因此，建立一种拆分对映体的方法，对提高药效和安全用药意义重大。

作为一次方法开发，就从拿到结构式开始。共轭结构、羰基等结构，显示紫外有吸收，可以选择紫外检测器；易溶于乙醇；含有仲胺、叔胺结构；二氢吡啶4位为手性中心。为了更高效的实验，减少盲目性，查阅文献也是必经之路。准备结束，选一款与文献性能接近的色谱柱，就开始实验了。
2.实验部分
2.1实验用品
Agilent1100紫外检测器；
正己烷、异丙醇均为色谱纯；
三乙胺为分析纯；
盐酸马尼地平、S-盐酸马尼地平对照品、R-盐酸马尼地平对照品；
2.2初始色谱条件
色谱柱：Venusil^® CA手性柱（5 μm，1000 Å；4.6 × 250 mm）；
流动相：正己烷︰异丙醇=90︰10；
流  速：1.0 mL/min；
波  长：236 nm；
柱  温：25℃；
进样量：10 μL。
2.3样品制备
R-盐酸马尼地平对照溶液：称取R-盐酸马尼地平样品适量，精密称定，以无水乙醇超声溶解，并稀释制成1.0 mg/mL的对照溶液；
S-盐酸马尼地平对照溶液：称取S-盐酸马尼地平样品适量，精密称定，以无水乙醇超声溶解，并稀释制成1.0 mg/mL的对照溶液；
盐酸马尼地平供试品溶液：称取盐酸马尼地平样品适量，精密称定，以无水乙醇超声溶解，并稀释制成1.0 mg/mL的供试品溶液；
2.4实验过程 

参照查阅文献，开始实验。结果发现，色谱峰拖尾，R型和S型重叠后有交叉，无法实现完全分离，有图有真相。
                                                                     

图1.S-盐酸马尼地平对照品溶液高效液相色谱图

图2.R-盐酸马尼地平对照品溶液高效液相色谱图

色谱峰拖尾，首先考虑到溶剂效应，更换了接近流动相的溶剂，并没有改善；

图3. 更换溶剂后S-盐酸马尼地平对照品溶液高效液相色谱图

其次考虑到进样量是否过大，减少进样量后，仍是严重拖尾。接下来，考虑到结构中含碱性基团，于是更换流动相，加入0.05%的三乙胺。屡试不爽的扫尾剂依然奏效了。

图4. R-盐酸马尼地平供试品溶液优化后高效液相色谱图

图5.S-盐酸马尼地平供试品溶液优化后高效液相色谱图

   

最后样品的分离自然不会差。

图6. 盐酸马尼地平供试品溶液优化后高效液相色谱图

图7.盐酸马尼地平供试品溶液优化后测试结果

2.5优化色谱条件
色谱柱：Venusil^® CA手性柱（5 μm，1000 Å；4.6 × 250 mm）；
流动相：正己烷︰异丙醇︰三乙胺=90︰10︰0.05；
流  速：1.0 mL/min；
波  长：236 nm；
柱  温：25℃；
进样量：10 μL。
3.实验心得
这次实验虽然对于很多色谱前辈来说再简单不过，也许不需要如此多的尝试就一步到位找到问题根基。但是对于我一个色谱新手来说，从查阅文献到成功分离，目标一点一点清晰，虽然只是解决了拖尾问题，还是真切的体会到色谱的魅力，所以很高兴跟大家交流分享，也希望以后能解决更加“高大上”的问题。
陈述中可能有很多不到位甚至错误的地方，希望大家多多指点，我也会积极改正哒！