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液相色谱（LC）

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主题：【求助】手性柱进左右旋混合对照的时候两个峰分不开。

浏览0 回复9 电梯直达

馒头只是一坨面

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发表于：2015/09/07 09:25:59 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

图一是左旋的对照品。图三是左旋样品。图二是左右旋进出来的图，主要是看左右旋的分离度，问题是这俩峰分不开啊。
手性柱。安捷伦1260.
流动相：乙腈：0.02mol/l磷酸氢二钠水溶液（20：80）
温度标准上没要求，设的25℃。波长360.
是哪里有问题。还是可以通过改变条件进行优化。
跪求。。

该帖子作者被版主 夏天的雪加 5积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖，发图有奖

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2015/9/7 9:51:18 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我降低了下流速，两个峰链接的那个点从高约120变到80，相应的峰变宽了一倍。然后，我就不知道还有啥然后了。

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馒头只是一坨面

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2015/9/7 10:29:50 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我看了一下，是柱子出了问题。头一阵进过样，出峰时间还在10分钟左右。我这才是第二次用。我感觉各种冲管路冲柱子弄的还可以啊。
才第二次用，对照品也买全了，柱子又不行了。让我去哪里哭！
那还有什么办法可以让这个手性柱变成它原来的样子么？！！

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老多_小多

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2015/9/7 10:34:47 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

手性柱没这么娇气吧，第二次用就不行了，这个柱子贵，你用纯有机相多冲冲看看吧

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2015/9/7 10:54:09 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:
手性柱没这么娇气吧，第二次用就不行了，这个柱子贵，你用纯有机相多冲冲看看吧

你好，柱子说明上写的如果，色谱柱被污染，用异丙醇/水1：2冲。
出峰时间提前了是被污染了，还是什么原因呢。
还有我是用1：2 的冲洗，还是什么样的纯有机相啊。
我真的从一个多月前用过一次，各种冲洗后，就用的这个出货溶剂保存啊。

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青石板

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2015/9/7 16:14:57 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你好，我是广州研创生物科技的小石，这张图我让我们技术工程师看了，已经有分离的趋势了，是可以达到基线分离的，不过方法需要摸索，如果您需要的话，请联系我13809280271.

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夏天的雪

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2015/9/7 16:29:19 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱峰从10min变为2min左右，先看一下是否是仪器有问题，单向阀之类的；从色谱图看峰宽有点宽，柱效似乎有点差，能否调节一下磷酸盐的pH值试试，个人建议，仅供参考

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2015/9/8 8:32:01 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
色谱峰从10min变为2min左右，先看一下是否是仪器有问题，单向阀之类的；从色谱图看峰宽有点宽，柱效似乎有点差，能否调节一下磷酸盐的pH值试试，个人建议，仅供参考

谢谢啊。我昨天重新配了个磷酸盐比例比标准上偏小的流动相，（事实证明以前跑得那个十分钟左右的样品峰是我流动相配错了，配对了之后就上面的样子了= =）跑出来的峰保留时间就长了，十多分钟。问题是如果按厂家的标准跑出来就是上图的样子。换了流动相对照那两个峰是分开了，分离度不够，又减小了进样量。分离度达到了，反正第二个峰长了超难看，拖尾有点严重，但是三个图的所谓那个保留时间的都是一样难看。我再改下磷酸盐试试。问题是柱子第一次用峰跑出来就很难看，凑活用了。。。。。

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