主题:【原创】【大曹色谱 液相豆丁帖】峰形变差怎么办?Part 1

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capcellpak
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在前几期液相豆丁帖的帮助下,压力终于稳了,保留时间也稳了,峰形…?!@#$%^&*()
前延!



拖尾!



裂峰!



怎么办怎么办?
别慌~让我们一个一个来~
首先,YoYo来帮您看看峰形前延问题
- 前 延 原 因 -
1、色谱柱自身出现问题

1)所有色谱峰均出现类似前延现象
2、液相方法或化合物结构问题
1) 溶剂效应
2)样品过载
3)化合物结构
- 诊 断 方 法 -
1. 根源:色谱柱

→ 现象:所有色谱峰均出现类似前延现象


也就是说,不论是死时间的溶剂峰,还是杂质峰,乃至主峰,均出现类似的前延峰形,如上图,可以看到所有峰的不对称因子均在0.7左右,呈现前延。
看到这种色谱图,基本就可以断定是色谱柱自身出现了问题。
解决方案:
一般情况下,当色谱柱问题导致峰形前延时,多为填料被腐蚀、受损所致。如下图,色谱柱入口端填料由于被腐蚀,已经出现了部分缺失的现象。



对于这种情况,可以尝试对色谱柱进行冲洗再生,但多数情况下效果并不理想,需要更换新的色谱柱。
大曹三耀の常规反相色谱柱冲洗方法:20%乙腈小流速冲洗过夜→80%乙腈冲洗2h
2.根源:液相方法 or 化合物结构
2.1.溶剂效应
样品溶剂和流动相差异较大时出现。
举个栗子,样品以100%乙腈溶解,而流动相为20%乙腈水溶液的情况。洗脱能力的差异或溶解性差异往往会导致峰形不佳的现象。

解决方案:
需要充分考察样品在流动相中的溶解能力,尽可能使用流动相对样品进行溶解。
2.2.样品过载

样品过载也可能导致峰形前延的问题。

解决方案:降低进样量
2.3.化合物自身结构
化合物结构和固定相之间力的作用也可能导致前延峰出现。

解决方案:
→改变流动相pH
→提高缓冲盐浓度
→调整柱温
关于方法和化合物自身结构的问题,通常需要具体问题具体分析。
该帖子作者被版主 夏天的雪10积分, 2经验,加分理由:原创奖励
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2019/2/12 9:33:40 Last edit by p3299836 举报
夏天的雪
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遇到前延或者拖尾峰,基本上 可以从这三个方面进行排查一下
yifan1117
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lijing320323
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