依然是反复的出现,反复一个月以来,排除了各种可能性,最终做了一个流动相富集测试。
证明呢在高纯水相走的时候会富集杂质,最终出峰。
我们的起始流动相约20-30%0.1%磷酸,B是乙腈,波长210-254,这个杂质最大吸收在238nm……
但工程师说,一般富集出现在5%-10%的水相作为起始梯度时,而且峰不高,大多就3.4mv。
问题是我们确实很高,20-150mv不定,时高时低,位置随着梯度斜率不同而改变,但是峰还是那个峰。
水是屈臣氏的水,乙腈是天地的,之前是FISHER,现在换了,但是鬼峰没什么变化。
我把滤膜也换了,就是抽水相的滤膜。换成了津腾的,昨天继续做了个捕集测试。发现,没变化,峰还是那个峰,更高了- -
接下来打算换成娃哈哈的水,再做一次捕集测试……
然后再换个磷酸再做捕集测试……
但是这如同大海捞针,如果都换了,依然有这个峰存在,大家一般怎么处理。
还有,我发现大部分岛津仪器容易产生这个情况,好像很少听说安捷伦沃特世等出现这个情况,
而且我们以前借用的是别人的安捷伦,确实没有这种鬼峰出现。
不知道岛津特意出什么捕集柱就是这个原因啊~~~
不知道其余同志是否也同感觉
求助求助
以下附捕集测试的图
分别是捕集前初始流动相等待10min、15min、20min、25min
其峰面积大小也可以看到,基本随着时间的延长而明显上升,换了滤膜的就不放上来了,基本跟这个差不多,而且更高- -!
流动相是0.1%磷酸和乙腈,磷酸还是HPLC级的呢,滤膜全是津腾的……………………
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从最开始的鬼峰问题到八月,反反复复三、四个月,目前终于找到原因解决问题,说原因简单到让人觉得自己过于愚笨,但是呢,确实也是被自己误导了。
最开始的鬼峰源于屈臣氏纯净水,达到了1500mv,后来反复冲洗,换水后鬼峰降到了几十。但是依然存在。
而倒霉的是,在换水这个时间段内,领导给乙腈换了厂商。当初换了水后发现还有鬼峰,便怀疑起了磷酸、仪器,滤膜。于是从磷酸,仪器,滤膜,甚至仪器泵头,检测器等,一个一个怀疑,一个一个排除,但是依然未解决问题。
于是正常思维是又怀疑到了流动相,流动相怀疑什么呢,怀疑外界引入,怀疑水相罗。
于是又反反复复换水,直到其中一台试了一下捕集柱后,问题勉强解决,但是捕集柱用久了也出现了同样的峰,虽小,但是在慢慢变大。
最后还是打电话给岛津,岛津紧急派出了专门解决该问题的人。当时提出的可能性是泵头富集了大量杂质,无法冲洗,于是工程师过来先把泵拆了全部清洗,清洗时发现里面的石英杆的杯子里超出来的水是浑浊的。
而在这之前,我也跟他讲了,我们有一台有白色的东西析出的现象,而我们没有用过盐。此时工程师怀疑,这么大的污染,不可能出自水相,用他的话说就是,水里有这么大的杂质,还不喝死人……那么就只有乙腈了!!!
于是赶紧借乙腈,但是由于以前用的Fisher,也有鬼峰,因此不敢用Fisher,去借了些默克的乙腈,换上一试,鬼峰没了!!!!
瞬间一颗石头落地!
此时缓缓反过来思考整个流程,终于找出了源头!问题出在TEDIA的乙腈上面!工程师认为我们大概率买了假货,但是这个乙腈是泰坦买的的,而天地也是大牌子,没想过会出这种问题!
后来我们用Fisher的也试了一下,Fisher也并没有鬼峰出现,此时可以证明,当时由于水相出问题的时候正好也换了乙腈!但是一直没有怀疑到乙腈上面去,以为出现在其他地方。
此事证明!一般越觉得没问题的地方越有问题啊!!!!
用工程师话说就是,污染不会平白无故出现!,总是有源头引入的!!!
一一排查总是可以的!
以上!