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主题：【已应助】新手请教：请问如何进行HPLC的柱子维护？

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发表于：2020/04/25 13:00:37 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
新手请教：请问如何进行HPLC的柱子维护？
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2020/4/25 13:18:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个问题百度下，有很多答案的。
色谱柱一般还是比较娇气的，注意的东西蛮多，我也接触不久，可以初略的谈谈。
一，注意柱子的安装。对柱子应该要温柔，不要太粗鲁，如果柱子遇到较大的机械力，会使里面的填料塌陷。在安装中，应把接头扭紧不漏液，但却不能太紧，这个只有自己把握。
二，流动相的选择和使用。一般柱子的pH要求在2——8左右吧（忘了具体了），所以流动相的pH最好应该注意点，实验前可以用pH计测定下，有必要时调整。流动相所选用试剂最好是色谱级的，这样减少对色谱柱的污染，对谱线的稳定也重要；如果是离子对缓冲液的话，最好在配制后，用滤膜过滤。
三，样品的处理。一般样品都含有很多的杂志，所以常常需要过滤、离心、过滤膜等。
四，流动相流速和温度不能急剧变化。流速和流动相不同配比应该缓慢改变，这样对柱子的冲击会小一点。
五，柱子的平衡时间。一般在测试之前，都会对色谱柱进行平衡。如果是常规的流动相（甲醇水啊，乙腈水啊之类的），平衡时间会少点，而如果是离子对缓冲液，那至少需用600umol才能覆盖色谱柱，即需要用1ml/min平衡1小时以上。
六，色谱柱在实验完后，需要冲洗。离子对缓冲液流动相的话，最好是把离子对缓冲液变成水的比例，加上有机溶液来冲（必须加有机液）
如果柱子保存时间不长，可以用50%的乙腈水溶液，如果时间稍长，就最好用纯有机液保存，反相色谱柱推荐用乙腈。
七，色谱柱不能放置过长时间，还是需要定期进行平衡的。
我还是菜鸟，暂时想到这么多，希望对楼主有用。
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