原文由 mouthsky 发表:
谢谢各位老师的解答。我是县市一级疾控中心的。每个月都要做50多份瘦肉精。目前来说采用的是德国拜发的前处理方法。破碎,提取,加酸,碱,离心,冷冻一天后再次离心。(主要是没有冷冻离心机)直接酶标初筛。酶标采用的国内狄恩的,拜发的酶标要重新包被,太过麻烦。而狄恩的预处理方法感觉无法满足初筛的要求。如果发现阳性,再过柱。我们现在的思路是,先不过柱浓缩,一般这样能作出阳性来的话,可以满足质谱的灵敏度要求。不知各位大师有什么指点。可以进一步改进检测工艺
原文由 icetrob 发表:原文由 mouthsky 发表:
谢谢各位老师的解答。我是县市一级疾控中心的。每个月都要做50多份瘦肉精。目前来说采用的是德国拜发的前处理方法。破碎,提取,加酸,碱,离心,冷冻一天后再次离心。(主要是没有冷冻离心机)直接酶标初筛。酶标采用的国内狄恩的,拜发的酶标要重新包被,太过麻烦。而狄恩的预处理方法感觉无法满足初筛的要求。如果发现阳性,再过柱。我们现在的思路是,先不过柱浓缩,一般这样能作出阳性来的话,可以满足质谱的灵敏度要求。不知各位大师有什么指点。可以进一步改进检测工艺
拜发的需要重新包被?不过柱出阳性可以满足质谱的灵敏度要求?不理解!
原文由 mouthsky 发表:
可能我说明的有点不清楚。我们购买的拜发产品需要包被抗体。当然这样对板子的保存要求相对没那么高。迪恩的则直接可加样,省略抗体包被过程。抗体本身负载在板子上。此外,不是说不过柱就上质谱。而是质谱的检测灵敏度相对较低,有时候显示阳性未必能被检测。不过柱就显示阳性的样品过柱后通过质谱检测,其灵敏度就基本可以满足要求。只是初筛的选择条件罢了:)不知是否解释清楚,惭愧一下^_^原文由 icetrob 发表:原文由 mouthsky 发表:
谢谢各位老师的解答。我是县市一级疾控中心的。每个月都要做50多份瘦肉精。目前来说采用的是德国拜发的前处理方法。破碎,提取,加酸,碱,离心,冷冻一天后再次离心。(主要是没有冷冻离心机)直接酶标初筛。酶标采用的国内狄恩的,拜发的酶标要重新包被,太过麻烦。而狄恩的预处理方法感觉无法满足初筛的要求。如果发现阳性,再过柱。我们现在的思路是,先不过柱浓缩,一般这样能作出阳性来的话,可以满足质谱的灵敏度要求。不知各位大师有什么指点。可以进一步改进检测工艺
拜发的需要重新包被?不过柱出阳性可以满足质谱的灵敏度要求?不理解!