主题:【已应助】新手求助液相色谱问题

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Insm_8b18c87b
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sec柱子分离纯蛋白,采用的流动相是ph为3的甲酸铵水溶液,出的峰为图一,降低流动浓度后峰为图二,原因是啥啊?感谢大佬的指导!
柱子是半年前买的,没用几次。
推荐答案:dadgoh回复于2021/07/06
低浓度下做一个紫外扫描,确认最大吸收是否偏移或减小。
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降低流动浓度是什么浓度,建议使用原有流动相分析看看有没有再现性
Insm_8b18c87b
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:降低流动浓度是什么浓度,建议使用原有流动相分析看看有没有再现性
原是20mmol/L甲酸安流动相,降低后是10mmol/L。重现性很好,做了五次都是这样子的
有水有渝
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用的是凝胶色谱柱吗,建议把色谱柱多清洗一下,流动相恢复20mmol/L甲酸铵试试
nuliyang
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:用的是凝胶色谱柱吗,建议把色谱柱多清洗一下,流动相恢复20mmol/L甲酸铵试试
是凝胶柱子
dadgoh
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低浓度下做一个紫外扫描,确认最大吸收是否偏移或减小。
nuliyang
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我忘了说明了,图一(20mmol甲酸铵流动相)那个红色的是220nm波长,图二(10mmol甲酸铵流动相)那个黑色的是220nm。因为不是连续做的,所以颜色不一样。。。
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