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主题：【已应助】HPLC测定香兰素的含量

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Maxbling
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发表于：2021/12/24 15:09:27 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位老师，本人最近在用HPLC测定固体粉末中香兰素的含量，方案是称取待测固体样品20mg于250ml容量瓶定容，再进行超声后离心，取上清液，过滤后进样。首先不知道这个方案是否正确，因为粉末中有些不确定的基材没办法溶解，因此需要离心；如果可以这么做的话，那么稀释倍数如何计算？是250倍？我在取上清液的时候是否也需要移取准确体积，比如2ml，稀释倍数变为500？对于这方面在网上看了好多帖子，一直没有准确答案，希望有大神能够帮我解惑，拜托了！！
推荐答案：Insm_603a714c回复于2021/12/27
不需要考虑你取多少，足够进样即可。因为仪器进样量通常供试品和对照品溶液一致，故计算不带入
只需考虑我进样溶液的浓度
举个例子，气相顶空测残留溶剂，对照品溶液浓度为0.1mg/ml，精密量取5ml置20ml顶空瓶中，，对照品溶液浓度依旧是0.1mg/ml,计算是使用5mg/ml
供试品溶液取0.1g置20ml，顶空瓶中，精密加入5ml溶剂，供试品溶液的浓度为20mg/ml
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2021/12/27 11:10:21 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不需要考虑你取多少，足够进样即可。因为仪器进样量通常供试品和对照品溶液一致，故计算不带入
只需考虑我进样溶液的浓度
举个例子，气相顶空测残留溶剂，对照品溶液浓度为0.1mg/ml，精密量取5ml置20ml顶空瓶中，，对照品溶液浓度依旧是0.1mg/ml,计算是使用5mg/ml
供试品溶液取0.1g置20ml，顶空瓶中，精密加入5ml溶剂，供试品溶液的浓度为20mg/ml
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robin_clhx
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2021/12/27 14:29:01 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果样品是称量20mg定容到250mL，通过超声方法，取上清液上机，假设目标物完全溶解在溶液里面，这样的倍率是250/0.02（12500）倍了。不需要再考虑取出2mL到样品瓶的体积，因为做的是溶液的浓度，与所取的溶液体积无关。回来再说样品溶解的问题，需要查一下标准方法或者文献资料，能查到类似测试对象的香兰素的样品溶液制备方法，超声、索氏提取、加热回流、微波等等都是可选的，前处理的目的是粉末样品中的香兰素能够完全释放到溶液当中就可以了，并不一定要求所有的粉末样品能够溶解。
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