主题:HPLC的正确使用和科学保养

浏览0 回复73 电梯直达
yzbjm
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aoc99
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mhq111111
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n流动相使用前必须经过:
n过滤---用0.45mm或0.25 mm滤膜过滤。滤膜有水相、有机相之分,使用时应注意水相滤膜不能用于有机相过滤。
n泵头滤芯赃了,可用硝酸浸泡,再用水洗净。
n脱气---采用超声或过滤的方法。
n避免使用对不锈钢有腐蚀性的溶剂。例
  硝酸、硫酸、盐酸、卤化物、四氯化碳与异丙醇或四氢呋喃的混合物、含强络合剂的溶液等。

mhq111111
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n柱压升高原因(使用柱压一般不要超过200bar)
n强保留样品组分——强吸附组分易聚集在柱进口填料上,严重缩短色谱柱寿命。尤其是生物样品提取物、含油成分等。当严重拖尾峰出现时往往是强保留污染物在柱口处聚集的信号。
n使用保护柱可延长分析柱寿命。
n每天实验后应用强溶剂(例甲醇等,至少20-30倍柱体积的量)冲洗色谱柱。
n并定期进行保养,以低流速的强溶剂较长时间冲洗色谱柱。

n样品纯度差——有微小的颗粒堵塞管路。
n可用滤膜过滤样品后再进样。

n样品浓度高——连续进样,造成过载。
n如果样品吸收度不是太低,使样品浓度在1mg/ml以下较适宜。

n流动相中缓冲液浓度过高,有机相比例大——在色谱过程中堵塞管路,析出的盐结晶还磨损泵、进样阀密封圈造成漏液。
n缓冲液浓度控制在20mmol以下较适宜,测定完毕后必须及时冲洗。

一旦柱压升高,应停止测定,用水冲洗数小时或更长时间,待压力下降后
再测定,如果不清楚堵在哪一段,则应逐级检查,换泵头上滤芯,
lebu
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