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主题：【求助】关于347.2-2018中粪大肠菌群阳性和阴性对照菌悬液浓度，如何配置成为300~3000MPN/L

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发表于：2023/06/07 14:31:24 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问各位老师，HJ347.2-2018中粪大肠菌群阴性和阳性对照菌悬液配置浓度为300~3000MPN/L，我们一般配置菌悬液按照CFU单位来，通过麦氏比浊管和浊度计l来估算，像MPN/L的单位浓度应该如何配呢
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2024/10/22 15:50:19 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
MPN（最可能数）法是一种用于估计样品中微生物数量的统计学方法，与 CFU（菌落形成单位）不完全相同。
以下是一种配置接近目标浓度 300 - 3000 MPN/L 粪大肠菌群菌悬液的方法：
一、准备工作
确定菌种：选择合适的粪大肠菌群阳性对照菌种，如大肠埃希氏菌等。
准备培养基：准备适合粪大肠菌群生长的培养基，如乳糖蛋白胨培养液等。
二、大致步骤
初步培养与计数
将菌种接种到适宜的液体培养基中，在合适的温度下培养一段时间（如 36℃?1℃培养 18 - 24 小时）。
培养后，采用平板计数法，即将菌液进行梯度稀释后涂布平板，培养后计数菌落，得到一个大致的 CFU 浓度。
估算与调整
根据平板计数得到的 CFU 浓度和培养体积等信息，估算菌液的总体微生物数量。
通过进一步稀释或浓缩菌液，使其接近目标范围的 MPN 值。由于 MPN 法通常需要进行多管发酵，在稀释过程中可以考虑按照 MPN 法的要求进行系列稀释，准备多个稀释度的菌液。
验证浓度
使用 MPN 法进行验证，即将不同稀释度的菌液分别接种到多管发酵管中，按照 HJ 347.2 - 2018 的方法进行操作，根据发酵结果查表确定最可能数（MPN）值。
如果 MPN 值不在目标范围内，继续调整菌液浓度，直到满足 300 - 3000 MPN/L 的要求。
需要注意的是，这个过程可能需要一定的经验和多次尝试，以准确配置出所需浓度的菌悬液。同时，操作过程中要严格遵守无菌操作规范，确保结果的准确性。
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