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液相色谱（LC）
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主题：【原创】【我们不一YOUNG】+液相流动相配制注意事项分享

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发表于：2024/07/18 09:30:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、溶剂选择：所选用的流动相溶剂应具有化学稳定性，不与固定相和样品组分反应，且纯度和化学特性应满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。溶剂应不干扰检测器的工作，选择在测定波长范围内无吸收的流动相。

2、溶剂纯度：使用HPLC级的溶剂和水，特别是水相流动相需经常更换，防止长菌变质。使用去离子水、针剂水、纯净水(炊用)并不合适，尤其是做梯度洗脱时，水中的不纯物会成为鬼峰，从而干扰分析结果。

3、流动相准备：流动相使用前应用0.45μm滤膜过滤、脱气，以清除微粒和灰尘，并防止在溶剂混合时或压力温度变化时产生大量气泡，导致泵误动作和输液不畅。流动相恢复到室温后使用，特别是水与有机溶剂混合时，混合液温度变化大，务必注意。

4、pH值控制：流动相的pH值过高或过低可能造成色谱柱填料被化学破坏。使用缓冲盐做流动相时，在使用前和使用后都要用水清洗流路，绝对禁止将缓冲溶液留在流路中静置过夜或更长时间。

5、含盐流动相：若需要使用含盐的流动相，使用前务必过滤，并且色谱柱需先用低比例有机相的溶液冲洗，以免缓冲盐析出。建议现用现配含盐的流动相，以免流动相因滋生微生物而造成柱填料的污染。

6、温度控制：校正溶剂的温度至室温，以确保体积一致和分析的重现性。这应该通过将溶剂放入热水或冷水浴中来完成，以适当调节溶剂温度所需的为准。

7、过滤器选择：在制备过程中过滤流动相时，选择正确的滤光片类型非常重要。对于HPLC系统，建议使用孔径为0.45μm或更小的膜式过滤器。对于UPLC系统，孔径应为0.22μm或更小。
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