原文由 123(m3149125) 发表:
1.?SPE柱选择不合适:如果SPE柱的吸附剂与目标化合物的化学性质不匹配,可能导致目标化合物未能有效保留。解决方法是选择对目标物有合适保留强度的SPE柱 。
2.?样品溶剂和淋洗液的洗脱梯度过强:如果样品溶剂或淋洗液的极性过强,可能会导致目标化合物过早地被洗脱,造成回收率低。解决方法是降低样品溶剂淋洗液的洗脱强度 。
3.?样品溶液体积或浓度过高:样品溶液体积过大或浓度过高可能导致目标化合物“穿透”SPE柱,即未被保留而流失。解决方法是降低上样量或增加分离柱填充料量 。
4.?SPE柱未进行有效的预处理:SPE柱在使用前需要进行活化和平衡,如果这一步骤未完成,可能影响目标化合物的保留。解决方法是加入溶剂进行活化和平衡 。
5.?目标化合物未被完全洗脱:如果洗脱液的强度不足或体积不够,目标化合物可能未能从SPE柱上完全洗脱。解决方法是提高洗脱液的洗脱强度或增加洗脱液体积 。
6.?萃取重现性差:操作过程中的不一致性,如流速过快或过慢,也可能导致回收率低。解决方法是控制合适的流速,确保操作的一致性 。
7.?基质效应:样品基质可能对目标化合物的保留和洗脱产生影响,导致回收率低。解决方法是优化前处理方案,例如调节洗脱液的强度或更换更合适的SPE柱 。
8.?SPE柱流速过低:如果SPE柱的流速过低,可能会影响目标化合物的保留和洗脱效率。解决方法是确保SPE柱没有被颗粒堵塞,并且样品溶液的粘度适宜 。
9.?目标化合物与杂质有结合:如果目标化合物与样品中的杂质结合,可能会影响其在SPE过程中的保留和洗脱。解决方法是在方法开发阶段对目标化合物进行详细了解,避免与杂质结合 。
感谢您的解答!还想请教您几个问题:
1、淋洗之后的干燥步骤,目前是用真空泵负压抽干小柱中的水分,直至小柱填料呈流沙状态,大概需要1个半小时,是不是抽的时间太长了,导致待测物流失太多?但是怎样才算把小柱里面的水分抽干了呢(小柱是什么状态)?
2、我尝试收收集了淋洗液,跟洗脱液一起氮吹、复溶、上机测试,看淋洗液中待测物的含量。但是得到的数据来看,淋洗液中内标的响应程度特别小,待测物的响应程度与内标的响应程度的比值很大,导致最后测出来的数据异常大,根本不具有参考性。按理论来说,同位素内标物与待测物的性质高度相似,在固相萃取过程中损失的比例应该差不多,这是什么原因?