主题：【第十七届原创】食品中甲醇含量的测定

食品中甲醇含量的测定

本实验依据《GB5009.266-2016 食品安全国家标准 食品中甲醇的测定》进行，适用于酒精、蒸馏酒、配制酒及发酵酒中甲醇的测定。测定时以叔戊醇为内标，样品经气相色谱分离，氢火焰离子化检测器（FID）检测，以保留时间定性,内标法定量。

一 试验条件

1.1 仪器设备

北京普析通用仪器有限公司；

G5气相色谱仪；

1.2 色谱条件

1.2.1 温度

进样口：250℃；柱箱：40℃；检测器温度：250℃；

温度程序：40℃（1min），4℃/min，130℃；20℃/min，200℃（5min）；

1.2.2 流量

载气：氮气；

进样模式：分流进样；

柱流量：约2mL/min（柱前压60kPa）；

分流流量：60mL/min；

1.2.3 色谱柱

KB-Wax ，30m×0.32mm×1.0μm；

1.2.4 样品

1.2.4.1 标准溶液

甲醇含量为100mg/L、200mg/L、400mg/L、800mg/L、1000mg/L系列标准溶液，现配现用。

1.2.4.2 内标物

分别吸取10mL甲醇系列标准工作液于5个试管中，然后加入0.10mL叔戊醇标准溶液（20000mg/L）；得到内标物浓度为200mg/L。

1.2.4.3 进样方式

微量注射器直接进样；进样量：1μL；

1.2.5 检测器

火焰离子化检测器（FID）；

空气流量：约150ml/min；

氢气流量：约30ml/min；

尾吹气（N2）：约30ml/min；

二 色谱图

三 讨论

在气相色谱分析中，一般使用厚膜色谱柱保留和分离如轻溶质、气体等挥发性溶质。使用厚液膜和较低的柱温结合可以获得更好的分离效能和峰形。下图展示了使用不同液膜厚度聚乙二醇色谱柱在相同条件下进行乙醇中甲醇的分离测试：

实验条件：

柱前压30KPa（约1mL/min），柱温40℃，分流流量20mL/min；

色谱柱规格：

30m×0.32mm×1.0μm

30m×0.32mm×0.25μm

虽然甲醇先于乙醇出峰，但由于甲醇和乙醇进样后会在柱头形成较宽的初始谱带且甲醇出峰较快，因此甲醇在色谱柱内进行溶解-分配时不仅受到固定相的相互作用，还会受到乙醇溶剂的影响，会造成峰形变差、峰宽增大、拖尾严重甚至分叉等现象（即溶剂效应）。

一、如果采用固定相液膜较厚的色谱柱，由于其具有更大的柱容量，可以溶解更多的乙醇溶剂，从而降低了液膜较薄时溶剂过载导致的溶剂（乙醇）与甲醇的相互作用，增强了固定相与甲醇的相互作用；

二、固定相液膜较厚的色谱柱具有更强的保留，化合物在固定相溶解-分配的过程越久，保留时间增加，塔板数下降，会导致峰形平缓和扩展，峰形的扩展会掩盖挥发性组分的拖尾从而改善色谱峰使之更加对称；

三、固定相液膜较厚的色谱柱具有较高的化学惰性，因为有更多的固定相来保护溶质不受色谱柱内壁表面的干扰，使用液膜较厚的色谱柱可以减少或消除活性化合物的色谱峰拖尾。