主题:【第十七届原创】如何检测牛奶中的体细胞数?

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如何检测牛奶中的体细胞数?



1.检测牛奶体细胞数的必要性

1.1牛奶体细胞数和乳品质量关系密切;

1.2牛奶体细胞数反映奶牛健康盒科学养殖水平;

1.3牛奶体细胞数发出疾病防控信号,利于及时行动减少损失;

1.4改善我国乳制品的出口现状。

2. 检测原理

采用荧光染色自动镜检原理,呲除染色剂外无需额外的化学试剂;干粉式染色剂不需要样品稀释液。排除液体染色剂挥发的影响;体细胞检测范围0-200万个/mL;

3. 仪器、耗材准备

仪器:国产HLD-SCC 800 牛奶体细胞计数仪、水浴锅、5-50μl移液枪、20-200μl移液枪、试管架、涡旋仪;

耗材:体细胞试剂、枪头;

4. 操作步骤

检测流程分为取样、样本处理、加样、上机检测、结果判读五个步骤。

4.1取样

奶样应为 8 小时内挤出的鲜奶,冻藏奶样需温浴后方可检测。

4.2样本处理

取出体细胞计数片和装有染色剂的离心管。用移液枪100ul奶样加到有干燥试剂的离心管中,吹打混匀 8-10 次,静置 3min,再次对样本吹打混匀 8-10 次;

4.3加样

将混匀的样本使用移液枪吸取8ul在芯片的进样口完成注样(注样后 15min内应完成检测)。

4.4上机检测

将已经注样的体细胞计数片插入仪器检测孔中,点击检测,仪器进入检测流程、确认通道界面,选择要检测的通道点击下一步即可进入检测;

1 检测状态

4.5结果判读

2检测结果

整体操作流程示意图如下图3所示:

3整体操作流程示意图



检测完成后点击“返回”返回主界面;点击“继续”,进入提示界面,进行下一次的检测;点击“打印”,打印此次结果。

5. 检测结果

检测样本:生鲜乳

样本状态:正常

序号

样品1(万个/毫升)

样品2(万个/毫升)

样品3(万个/毫升)

样品4(万个/毫升)

样品5(万个/毫升)

流式细胞仪参考值

51.50

43.90

44.80

53.80

29.90

1

54.94

40.85

49.36

50.97

33.40

2

52.48

39.71

48.13

46.55

34.55

3

52.67

39.81

46.90

51.42

33.59

4

52.86

41.89

45.67

49.05

31.39

平均值

53.24

40.57

47.52

49.50

33.23

STD

0.99

0.89

1.38

1.92

1.15

cv

1.86%

2.18%

2.89%

3.88%

3.46%



由上表的CV值可以看出,该仪器检测同一样品重复性好、准确率高;

6. 注意事项

6.1使用原厂配置的适配器,并有效接地;

6.2仪器有松动和掉落时,请勿使用并联系售后支持;

6.3不在倾斜、振动及不稳定的环境下使用仪器;

6.4请勿使仪器进入水份;

6.5移动仪器需先拔出插头;

6.6仪器与周围墙面应留有不小于 5cm 的间隙便于散热;

6.7不要在仪器表面堆放其他物品;

6.8处理潜在污染物时,应做好个人防护,并按要求处理样品和检测后的卡片,并定期清洁并消毒仪器。

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