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主题：【分享】为何全新色谱柱测试结果低于出厂报告值(测试样品与条件完全一致时)?

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zhangyongmei
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发表于：2024/10/24 10:36:17 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以下三种情况比较常见:
1、对于沃特世色谱柱，全新色谱柱的实验室柱效测试结果，低于出厂报告值(通常降低幅度在30%以内)，是符合预期的。为了尽可能的反映出色谱柱本身的柱效情况(色谱柱装填优劣程度)，沃特世对用于进行柱效测试的系统做出相应的调整，以获得最小的系统扩散体积。这样经过特殊调整的测试系统，扩散最小,常规系统测试效果无法与之比较，通常柱效降低程度在30%以内都是可以接受的。但是，如果降低幅度过大，例如仅有出厂报告值50%时，请联系色谱柱生产厂家。
2、色谱柱柱效,会受到系统扩散体积的影响。如果系统扩散体积较大，就会导致色谱柱柱效测试结果偏低，这也是常见情况之一。值得注意的是，色谱柱体积越小，受到系统扩散体积的影响就越大;此外，如果色谱峰出峰越快，受到系统扩散体积的影响也会越大。所以，小颗粒(<3 μm)色谱柱，如果柱体积较小，且出峰时间较快，更容易受到系统扩散的影响，我们常常发现沃特世UHPLC色谱柱在非沃特世系统上的柱效测试结果显著偏低。
3、色谱柱装填不理想，或者在运输过程中遭到过严重的震荡磕碰,柱床不稳定发生变化,也会导致测试时柱效迅速下降(可以通过连续进针观测)。对于GPC柱、或早期色谱柱产品(例如,Waters Bondapak,是10μm不定形硅胶颗粒),因为填料自身性质,色谱柱床装填并不十分紧密，在使用过程中需要特别注意避免较高压力、以及柱压力的迅速增加(建议用台阶法设置流速)，对于小颗粒色谱柱，装填非常紧密，通常不应发生此类问题。
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