主题：请问有做生物大分子核磁谱图的么？

原文由 zxw507 发表:
生物大分子，比较难做好像

原文由 freeboy77 发表:
>请问做生物大分子，如多肽和蛋白，一般浓度为多少比较合适？
1mM左右。在没有聚合的情况下，越高越好

>是否需要用H2O/D2O=90%:10%做溶剂？D2O不会把活泼H交换掉么？
不是必须的。10％的D2O只会交换掉少部分的活泼氢，影响不大。而且可以降至5％

>是否需要做与生理条件类似的缓冲溶液？
不一定。根据样品需要。

>二维COSY/TOCSY/NOESY或ROESY谱图怎么压水峰？
很多种方法，取决于你使用的程序。常见的有预饱和，3919等

>一般做NOESY的时候混和时间取多少比较合适？
取决于分子量大小。小肽可以做到400-500ms，100氨基酸的大分子在100ms左右

另外，二维谱1H解析蛋白质，通常最多只能做到70个氨基酸大小的蛋白
更大的需要使用同位素标记，三维谱

原文由 freeboy77 发表:
>请问做生物大分子，如多肽和蛋白，一般浓度为多少比较合适？
1mM左右。在没有聚合的情况下，越高越好

>是否需要用H2O/D2O=90%:10%做溶剂？D2O不会把活泼H交换掉么？
不是必须的。10％的D2O只会交换掉少部分的活泼氢，影响不大。而且可以降至5％

>是否需要做与生理条件类似的缓冲溶液？
不一定。根据样品需要。

>二维COSY/TOCSY/NOESY或ROESY谱图怎么压水峰？
很多种方法，取决于你使用的程序。常见的有预饱和，3919等

>一般做NOESY的时候混和时间取多少比较合适？
取决于分子量大小。小肽可以做到400-500ms，100氨基酸的大分子在100ms左右

另外，二维谱1H解析蛋白质，通常最多只能做到70个氨基酸大小的蛋白
                                  ~~~~~~~~~~~~
                      同核谱真的可以达到70个吗？？在600MHz谱仪实际操作中50个好像已经很难了


更大的需要使用同位素标记，三维谱

原文由 freeboy77 发表:
>>另外，二维谱1H解析蛋白质，通常最多只能做到70个氨基酸大小的蛋白
>>                                  ~~~~~~~~~~~~
>>        同核谱真的可以达到70个吗？？在600MHz谱仪实际操作中50个好像已经很难了

原则上是可以的，当然也取决于蛋白质的性质
比如Biochemistry 1998, 37, 9641-9649  是80个氨基酸
Eur. J. Biochem. 258, 502-514 (1998)是77个氨基酸
不过这两个使用了750M和800M的谱仪
Biochemistry 1992, 31, 1011-1020是78个氨基酸在500M上做的

国内生物物理所的Biochimica et Biophysica Acta 1594 (2002) 353-363也做了62个氨基酸的蛋白，使用600M

在PDB中搜索一下应该还有很多同核二维做到70个氨基酸的例子

原文由 nmrviewer 发表:

原文由 freeboy77 发表:
>>另外，二维谱1H解析蛋白质，通常最多只能做到70个氨基酸大小的蛋白
>>                                  ~~~~~~~~~~~~
>>        同核谱真的可以达到70个吗？？在600MHz谱仪实际操作中50个好像已经很难了

原则上是可以的，当然也取决于蛋白质的性质
比如Biochemistry 1998, 37, 9641-9649  是80个氨基酸
Eur. J. Biochem. 258, 502-514 (1998)是77个氨基酸
不过这两个使用了750M和800M的谱仪
Biochemistry 1992, 31, 1011-1020是78个氨基酸在500M上做的

国内生物物理所的Biochimica et Biophysica Acta 1594 (2002) 353-363也做了62个氨基酸的蛋白，使用600M

在PDB中搜索一下应该还有很多同核二维做到70个氨基酸的例子

顶！
受益非浅。请问你用那套软件来处理、分析、指认和计算？谢了。