主题:求助:用液相做氨基酸分析的方法

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lebu
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现在我们要用液相做氨基酸分析,但是苦于没有方法,希望做过的朋友赐教!
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Easy-Boy
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好像要有柱前衍生化方法,Agilent似乎有全套的分析方法,包含柱子和衍生化方法
qh-zhang
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通常是柱前衍生,国内的依利特、安杰尔等、国外的WATERS等公司有相关产品,需要衍生试剂、色谱柱。你可以上网站问问。
miaoyan
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做氨基酸要用梯度,一般是紫外和荧光的检测器,有柱前和柱后两种方法。但现在用的比较多的是柱前的方法。Agilent的不太清楚,我用过Waters的,有专用的一套衍生试剂包 还是柱子,还有方法。但好像方法都是针对他们家仪器的配置,不知道别人家仪器行不行。衍生我觉得都一样啊
制备液相
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通常来说
就是一个特种柱子,还有一个柱前衍生的包哈!
还有就是你的仪器,梯度精度一定要好,不然,有一些氨基酸有可能分不开的!
lebu
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做过的朋友可不可以上传一个具体的方法?
柱子已经买了,关键是衍生包和具体的处理方法!
neon
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氨基酸的液相分析方法有很多种,waters和agilent都有相应的方法包,但是价格比较贵,也有很便宜的方法包(方法简便一看便会)和图谱可以免费提供给你,请与我联系neon98@tom.com
cherry39
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我建议你用色谱分离,柱前衍生,荧光检测的方法,这样灵敏度高。
qingqingcao
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氨基酸分析由于有些氨基酸缺少发色基团检测是个问题。国标上用日立L-8500,L-8800氨基酸分析仪。可能相对价格高一些。
lxyz
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palmT5
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回楼主,这种方法有的是,在网上可以找到。再有各公司都有专门用于做氨基酸的柱子和试剂包。可选的品牌多的是。总体上欧洲高于美国高于日本高于其它。
 这是我在药分网上看到一个方法。仅供参考。附图。
HPLC方法                         
色谱柱: ProntoSIL 120-3-C18 H, 200 x 3.0 mm ID
固定相: ProntoSIL 120-3-C18 H
样品预处理: SIGMA standard AA-S-18; OPA柱前衍生
检测器: 荧光检测器(Ex 330 nm, Em 450 nm), 紫外检测器(330 nm)
条件:
流动相: A) 20 mM 醋酸钠水溶液/乙腈(97:3, v/v)  B) 20 mM 醋酸钠水溶液/乙腈(50:50, v/v)
梯度: 在0-144 s          5 – 28 % B
      145 – 560 s      28 – 45 % B
      561 – 896 s      45 – 82 % B
      897 – 1215 s      82 – 90 % B
流速: 0.6 ml/min
温度: 30°C
进样量: 1 µl





色谱图   
1. 天冬氨酸          9. 酪氨酸
2. 谷氨酸            10. 缬氨酸
3. 丝氨酸            11. 半胱氨酸
4. 甘氨酸            12. 蛋氨酸
5. 苏氨酸            13. 异亮氨酸
6. 组氨酸            14. 苯丙氨酸
7. 丙氨酸            15. 亮氨酸
8. 精氨酸            16. 赖氨酸


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